El rol del ciclo de tirosinación/detirosinación del extremo C-terminal de la α-tubulina no se conoce. Esta tirosina puede ser sustituida por un análogo, azatirosina (un átomo de N reemplaza el C2 del anillo aromático). Este análogo es conocido por su capacidad de revertir el tipo canceroso de células en cultivo. De modo que pensamos que este efecto podría ser debido a la sustitución de tirosina por azatirosina en el C-terminal de tubulina, e investigamos esta posibilidad. Dado que azatirosina también se incorpora en proteínas por síntesis ?de novo? vía tirosil-tRNA sintetasa, hubo que diseñar un experimento que permitiera discernir entre los dos tipos de incorporaciones de azatirosina. Se incubaron células C6 (provenientes de glioma de rata) en medio F12K (tirosina 60 uM) en ausencia y presencia de azatirosina (concentraciones variables) durante tiempos variables. Se analizó el grado de proliferación, grado de diferenciación, y viabilidad. Para cada situación se determinó por Western blot la cantidad relativa de tubulinil-azatirosina en las células, usándose un anticuerpo específico obtenido en nuestro laboratorio. Se encontró una situación (2 días de incubación, concentración de azatirosina <100 uM) en la cual no se produce reducción de la tasa de proliferación pero la cantidad de tubulina con azatirosina incorporada es similar a la determinada para células crecidas en presencia de azatirosina 600 uM, en la cual el cese de proliferación es total, y con significativa diferenciación celular. Estos resultados indican que la incorporación post-traduccional de azatirosina en el extremo C-terminal de α-tubulina no está directamente relacionada con el efecto anticancerígeno de la azatirosina.
