Atenuación de la encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) por administración oral de una proteína de fusión entre el péptido de sinapsina ABC y la subunidad B de la toxina lábil al calor de Escherichia coli.
M.J. Bibolini, M.J. Scerbo, G.A. Roth, C.G. Monferran.
La EAE es una enfermedad inflamatoria demielinizante del sistema nervioso central que requiere la activación de células T autoreactivas principalmente contra la proteína básica de mielina (PBM). En el presente trabajo examinamos el efecto de una proteína de fusión entre la subunidad B de la toxina lábil al calor de E. coli (LTB) y los dominios ABC de sinapsina Ia de rata (LTBABC) en la EAE. Las proteínas LTBABC y LTB recombinantes obtenidas en E. coli fueron purificadas y renaturalizadas observándose que la afinidad de LTBABC por su receptor GM1 en células HT29 fue 5-10 veces menor que la de LTB. Teniendo en cuenta esta relación se administraron oralmente 6 dosis de 100 µg de LTBABC, 2 g de LTB o diluyente a ratas Wistar luego de la inducción activa de la enfermedad con mielina bovina en adyuvante de Freund completo. A los 9 días pos inducción (dpi) se realizó la reacción de DTH contra la PBM y a los a los 11-14 dpi se extrajeron células mononucleares (CMN) de ganglios poplíteos, nódulos linfáticos mesentéricos y bazo para ensayos de proliferación contra PBM y determinación de citoquinas (INF-γ e IL10) en los sobrenadantes de cultivo. El tratamiento con LTBABC disminuyó el grado de severidad de la enfermedad a los 12 y 13 dpi, la DTH y la proliferación de CMN específicas contra PBM con respecto al grupo control y al tratado con LTB. Además, los animales tratados con LTBABC mostraron menores niveles de INF-γ e incrementos de IL10 en los tres órganos respecto del grupo control y el tratado con LTB. Estos resultados indican que la administración oral de LTBABC luego de la inducción de la EAE reduce los síntomas clínicos de la EAE a los 12 y 13 dpi a través de la generación de tolerancia periférica. Los resultados presentados sugieren que péptidos de sinapsina conjugados a la subunidad B de la toxina lábil al calor de E. coli tienen un rol protectivo con potencial terapéutico para el tratamiento de la EAE como de la múltiple esclerosis.
