Atenuación de la encefalomielitis autoinmune experimental (EAE) por administración oral de una proteína de fusión entre el péptido de sinapsina ABC y la subunidad B de la toxina lábil al calor de Escherichia coli.
Bibolini MJ, Scerbo MJ,
La EAE es una enfermedad inflamatoria demielinizante del sistema nervioso central que requiere la activación de células T autoreactivas principalmente contra la proteína básica de mielina (PBM). En el presente trabajo describimos el efecto de una proteína de fusión entre la subunidad B de la toxina lábil al calor de E. coli (LTB) y los dominios ABC de sinapsina Ia de rata (LTBABC) en la EAE. Las proteínas LTBABC y LTB recombinantes obtenidas en E. coli fueron purificadas y renaturalizadas observándose que la afinidad de LTBABC por su receptor GM1 en células HT29 fue 5-10 veces menor que la de LTB. Teniendo en cuenta esta relación se administraron oralmente 6 dosis de 100 µg de LTBABC, 2 mg de LTB o diluyente a ratas Wistar luego de la inducción activa de la enfermedad con mielina bovina en adyuvante de Freund completo. A los 9 días pos inducción (dpi) se realizó la reacción de DTH contra la PBM y a los a los 11-14 dpi se extrajeron células mononucleares (CMN) de ganglios poplíteos, nódulos linfáticos mesentéricos y bazo para ensayos de proliferación contra PBM y determinación de citoquinas (INF-γ e IL10) en los sobrenadantes de cultivo. El tratamiento con LTBABC disminuyó el grado de severidad de la enfermedad a los 12 y 13 dpi, la DTH y la proliferación de CMN específicas contra PBM con respecto al grupo control y al tratado con LTB. Además, los animales tratados con LTBABC mostraron menores niveles de INF-γ e incrementos de IL10 en los tres órganos respecto del grupo control y el tratado con LTB. Estos resultados indican que la administración oral de LTBABC luego de la inducción de la EAE reduce los síntomas clínicos de la EAE a los 12 y 13 dpi a través de la generación de tolerancia periférica. Los resultados presentados sugieren que péptidos de sinapsina conjugados a la subunidad B de la toxina lábil al calor de E. coli tienen un rol protectivo con potencial terapéutico para el tratamiento de la EAE como de la múltiple esclerosis.