El desarrollo de estructuras diferenciadas de propagación vegetativa
(conidias) en Neurospora crassa
incluye una serie de eventos morfogenéticos que concluyen con la
desarticulación de conidióforos. En la mutante de separación conidial csp-1 las conidias permanencen unidas
en el conidióforo, sin mostrar alteraciones adicionales del crecimiento
vegetativo. El locus csp-1 ha sido mapeado en la región del centrómero del
cromosoma I (LGI) desconociéndose aún su identidad y/o función. Con el fin de
conocer la base molecular del defecto de desarrollo y morfogénesis en csp-1,
utilizamos estrategias de caminata cromosomal, mapeo por RFLPs, y
transformación y complementación de fenotipos, que permitieron clonar un gen
supresor (sup1/csp1) posicionado
sobre LGVI (SAIB 1995). A partir de cDNAs correspondientes a sup1/csp1, determinamos su secuencia de
nucleótidos (2980 nt) y definimos un ORF de 783 aa. La composición de G+C del
gen es de 56,9% y el uso de codones corresponde al de un gen de expresión
regulable en N. crassa. El
transcripto de sup1/csp1 no pudo ser
detectado en northern blots de micelio vegetativo o de conidias (D. Ebbole, University of Texas) sugiriendo
que el mismo se encuentra en muy bajos niveles. El producto codificado por el
gen mostró una interesante homología con un grupo particular de glucoamilasas
de levaduras. Esta observación indicaría que el fenómeno de supresión mediado
por sup1/csp1 se debería a la
expresion anormal de una actividad modeladora de pared celular afectada en csp-1. Hemos aislado mutantes sup1/csp1- a través de RIP
(repeat-induced point mutation). El estudio de fenotipos de estas mutantes
permitiría determinar si el supresor confiere una función normal vinculada a
actividad glucoamilasa.
