La participación de los factores de trasncripción c-Fos y c-Jun en procesos celulares normales y oncogénicos está bien caracterizada. Su asociación a membranas há sido descripata más recientemente, posibilitando el estudio de estas proteínas desde el punto de vista biofísico.
Nuestro propósito es estudiar qué posibles interacciones y efectos pueden ejercer c-Fos y c-Jun sobre componentes celulares fuera del conocido contexto del complejo transcripcional. Hemos encarado estudios de dispersión de rayos X a bajo ángulo (Small Angle X Ray Scattering, SAXS) de ambas proteínas en solución, y de su asociación a vesículas fosfolipídicas, así como de la asociación entre ambas para formar el heterodímero que posee actividad transcripcional.
Sabemos por estudios previos realizados en monocapa que una variedad de interfases (fosfatidilcolina, fosfatidilserina, fosfatidilglicerol o fosfatidilinositoles) estabilizan c-Fos y c-Jun con parámetros termodinámicos de magnitud comparable a la de proteínas anfitrópicas activas en membrana. Más aún, interacciones diferenciales de c-Fos con fosfolípidos inducen cambios en la organización que afectan otros elementos constituyentes o asociados a membrana, como actividad de enzimas que median eventos de transducción de señales.
Hemos aplicado SAXS en incubados de c-Fos y de c-Jun con vesículas de dimiristoil fosfatidil colina (DMPC) puras o con pequeñas proporciones de fosfatidilinositol difosfato (PIP2) en un rango de temperaturas que abarcan la transición de fase gel-líquido cristalina de DMPC. Utilizamos condiciones experimentales que permiten resolver en el rango 50-200 Å para detectar distorsiones de la bicapa lipídica inducidas por asociación de la proteína. Pudimos determinar que por debajo de la transición del lípido el espesor de la bicapa no es modificado por asociación de c-Fos o de c-Jun, aunque ambas proteínas estabilizan las vesículas disminuyendo su polidispersión. Esto sugiere que las proteínas se adsorben sin penetrar en la bicapa. En fase líquido cristalina c-Fos o c-Jun inducen asociación de vesículas de DMPC siendo este fenómeno reversible. Estos resultados refuerzan nuestra hipótesis de que factores de transcripción tendrían la capacidad de modificar el estado de membranas de diversas maneras, no sólo cambiando el estado de empaquetamiento lipídico sino también induciendo reorganización de las mismas.
Trabajo financiado por SECyT-UNC, FONCyT y LNLS-Campinas, Brasil.
