Participación de la proteína Anexina A1 y del receptor de TNF alfa en el desarrollo de un modelo animal sde colitis ulcerosa

SENA AAS, PEDROTTI LP, BARRIOS B, PRINDEVILLE T, SANKARAN-WALKERS S, GOULART LR, CORREA SG

Córdoba

Congreso; Congreso Argentino de Gastroenterología y Endoscopia Digestiva; 2013

TO/PD-04 PARTICIPACIÓN DE LA PROTEÍNA ANEXINA A1 Y DEL RECEPTOR DE TNF-ALFA EN EL DESAROLLO DE UN MODELO ANIMAL DE COLITIS ULCEROSA Sena, AAS(1); Pedrotti, LP(1); Barrios, B(1); Prindeville, T(2); Sankaran-Walters, S(3); Goulart, LR(3); Correa, SG(1) (1)Centro de Investigación en Bioquimica Clinica y Inmunologia ? CONICET ? UNC, Córdoba, Argentina (2)Department of Internal Medicine, University of California, Davis, USA (3)Department of Medical Microbiology and Immunology, University of California, Davis, USA Introducción: La proteína anexina-a1 (ANXA1) está presente en células de la inmunidad innata y adaptativa y tiene diversas funciones en las fases aguda y crónica de la inflamación. Objetivos: Como las perturbaciones en la inmunidad intestinal y la producción de TNF-alfa son cruciales para el desarrollo de enfermedades inflamatorias intestinales (EII), investigamos la expresión y actividad de ANXA1 en pacientes con EII y en un modelo de colitis ulcerosa en ratones deficientes para la señal de TNF-alfa (TNFR1-/-). Pacientes, materiales y métodos: En tejidos de colon de pacientes con EII (colitis ulcerosa y enfermedad de Crohn) y controles sanos se investigó la expresión de ANXA1 por inmunofluorescencia. La colitis ulcerosa se desarrolló en ratones B6 normales o TNFR1-/- mediante administración oral de sulfato de dextrano sódico al 3% durante 18 días. Algunos ratones se trataron con anticuerpo anti-ANXA1. Durante el experimento estudiamos los datos clínicos (peso, largo del colon, consistencia y sangre en las heces) y los días 0 y 18 evaluamos los aspectos histopatológicos del colon, la expresión de ANXA1 en linfocitos T y fagocitos purificados de lámina propia (citometría de flujo) y la producción de IL-6 y IL-10 en sobrenadantes de explantos de colon (ELISA). El análisis estadístico de los datos incluyó ANOVA y Student?s T test. Resultados: En tejidos de colon humano con EII, la expresión de ANXA1 fue indetectable en las células epiteliales y en el infiltrado inflamatorio, a diferencia de los controles. Los ratones TNFR1-/- presentaron menor pérdida de peso, menor severidad de la colitis y mayor integridad tisular, en comparación con los B6. Las células T CD4 y CD8 de ratones B6 presentaron mayor expresión de ANXA1 con el curso de la inflamación, mientras que ANXA1 se mantuvo inalterada en linfocitos de ratones TNFR1-/-. En contraste, células mieloides CD11b+ en los TNFR1-/- presentaron una intensa expresión de ANXA1 antes de la colitis, que se redujo en la fase más severa y se restableció en la fase de resolución. El bloqueo de la ANXA1 endógena exacerbó la producción de IL-6 en explantos de colon de animales B6 y TNFR1-/- mientras estimuló menor expresión de IL-10 en los TNFR1-/- y en los animales B6. Discusión y conclusiones: Los datos sugieren la participación de ANXA1 en la homeostasis intestinal, ya que su expresión se perdería en tejidos dañados por la EII. Ante el bloqueo de la vía de señalización del TNF-alfa, imitando el tratamiento con infliximab, la colitis es moderada y ANXA1 muestra una expresión selectiva en distintos tipos celulares. Además, esta proteína participa en la regulación de citoquinas claves en el balance inflamatorio (IL-6)/anti-inflamatorio (IL-10). Caracterizar la actividad biológica de ANXA1 en modelos que reproducen los efectos de tratamientos con biológicos permitirá avances en la comprensión de los mecanismos inmunopatogénicos y en el desarrollo de nuevas terapias de EII