Determinación de la actividad de la enzima superóxido dismutasa en la fracción mitocondrial de Caenorhabditis elegans

LUNA FERNANDA; CAÑETE VALENTINA; ALBRECHT, PAULA A.; DEZA-PONZIO, ROMINA; VIRGOLINI, MIRIAM B.

Córdoba

Jornada; VIII Jornadas de Posgrado y II Jornadas de Ciencia y Tecnología de la Facultad de Ciencias Químicas; 2018

La adecuada funcionalidad mitocondrial es determinante para el estado de salud y enfermedad. La actividad metabólica trae aparejada la producción de especies reactivas oxigenadas (ROS) con efectos tóxicos asociados que son contrarrestados por enzimas antioxidantes, incluyendo superóxido dismutasas (SODs). El presente proyecto tiene por objetivo la determinación de la enzima mitocondrial MnSOD en el organismo modelo C. elegans. Poblaciones de gusanos N2 (cepa salvaje) serán mantenidas en placas de agar sembradas con bacterias OP50 y sincronizadas para obtener gusanos jóvenes (estadío L3). Posteriormente serán lavadas, resuspendidas en buffer M9, homogeneizadas con buffer de ruptura y centrifugadas para obtener el sobrenadante para la medición de SOD por la técnica de azul de formazán cuya generación es inversamente proporcional a la actividad de la enzima en la muestra. La concentración de proteínas se medirá por el método de Bradford. Se espera que la determinación de esta enzima en C. elegans potencie su rol como biomarcador de daño por estrés oxidativo en disfunciones mitocondriales incluyendo a las causadas por tóxicos ambientales como metales y pesticidas.