Identificación de genes expresados diferencialmente en tejidos trofoblásticos

ABADIE P.; DURAND S.; DUMUR C.; FLURY A.; GENTI-RAIMONDI S.

Mendoza

Congreso; XXXV Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular; 1999

Sociedad Argentina de Investigación en Bioquímica y Biología Molecular

Con el fin de determinar las bases moleculares de las alteraciones fenotípicas presentes en las enfermedades trofoblásticas gestacionales e identificar genes cuya expresión está específicamente asociada con el fenotipo maligno se comparó mediante Differential Display (DD) la expresión de los mRNA aislados de placenta humana a término, mola hidatiforme completa, enfermedad trofoblástica persistente y la línea celular de coriocarcinoma JEG-3. Se aislaron numerosas bandas con expresión diferencial, tres de las cuales correspondieron a genes mitocondriales cuya expresión está disminuída en las enfermedades trofoblásticas (SAIB 98). En esta comunicación se muestra el clonado y la caracterización parcial de diez bandas nuevas aisladas del DD. Ensayos de Northern blot confirmaron la expresión diferencial de cinco de dichas bandas, tres de las cuales presentaron identidad con la proteína ribosomal L27, la ribonucleoproteína A1 Y con la EST 88970 Zn finger, respectivamente. En las cinco bandas restantes no se pudieron detectar transcriptos en ensayos de Northern blot, por lo que tampoco se pudo confirmar su expresión diferencial, sin embargo dichas bandas fueron secuenciadas y luego clasificadas en Secuencias Desconocidas y Secuencias Conocidas. En la primera categoría se obtuvieron dos bandas que no presentaron homología con secuencias almacenadas en GenBank hasta el presente. En la categoría de Secuencias Conocidas se obtuvieron tres bandas, entre las que figura un transcripto de 1.9 kb expresada en placenta humana (EST 78824) cuya función se desconoce. La segunda banda corresponde al mRNA de Homo sapiens que codifica para una proteína de función desconocida (KIAA0992). Por último, la tercer banda demostró identidad completa con el gen LMO4 cuya expresión está incrementada en cáncer de mama. Se discute la participación de estos genes en el fenotipo tumoral.