Multiples señales intracelulares determinan la inducción de la replicación de T. cruzi en macrófagos estimulados con cruzipaina.
Cinthia C. Stempin, Fabio M. Cerbán.
Inmunología. Dpto. Bioquímica Clínica. Facultad Ciencias Químicas. Universidad Nacional de Córdoba. cstempin@bioclin.fcq.unc.edu.ar
Cruzipaína (Cz) induce la activación alternativa de macrófagos (Mo), favorece el crecimiento intracelular de T. cruzi e induce arginasa (ARG) por señales intracelulares mediadas por Protein Kinasa A (PKA) y p38 MAPKinasa. En este trabajo se estudió si las señales intracelulares que regulan ARG también pueden regular el crecimiento del parásito en Mo. A tal fin, Cel J774 fueron tratadas 6 h con diferentes inhibidores de PKA, PKC, tirosin kinasas (TK), p38 y p44/p42 MAPK (KT5720, Calphostin C, Genistein, SB203580, PD98059, respectivamente) previo al estímulo de 18 h con Cz. A estas Cel se las infectó con tripomastigotes (Tp) (4Tp/Cel) durante 24 h. En las Cel tratadas con Cz, a diferencia de las Cel no tratadas, se produjo un incremento de amastigotes (Ama), y en las Cel tratadas con Genistein, KT5720 y SB203580 se produjo una disminución de Ama a las 72 h post-infección (p.i.). El número de Ama en Mo se correlacionó en forma inversa con la actividad de iNOS y en forma directa con la de ARG. El tratamiento con NOHA (inhibidor de ARG) anuló el aumento de Ama inducido por Cz en los Mo infectados. Además, KT5720 disminuyó la expresión de ARG I en Cel incubadas con Cz. Para conocer si ésto ocurre in vivo se infectaron ratones BALB/c con 500 Tp y se estudió ARG en Mo peritoneales y el grado de infección en Mo de bazo a los 8, 15 y 19 días p.i. La actividad y expresión de ARG I fueron máximas en el día 19, donde se evaluó el efecto del tratamiento de los Mo ex vivo con los inhibidores mencionados. NOHA, KT5720 y SB203580, al igual que en los ensayos in vitro, fueron capaces de disminuir el número de Ama en los Mo infectados. La inhibición de multiples señales intracelulares mediadas por PKA y p38 MAPK desfavorece el crecimiento intracelular de T. cruzi inducido por Cz en Mo.
