Las funciones de la adenohipófisis son reguladas por el 17-beta estradiol (E2) activando cascadas de señalización que interactúan con las vías utilizadas por los factores de crecimiento.
Nuestro objetivo fue evaluar la participación de las vías óxido nítrico (NO)/guanilato ciclasa (GC) y Proteína Quinasa C (PKC)/ ERK1/2 en las acciones del E2 en interacción con insulina (Ins) sobre la actividad proliferativa de las células lactotropas.
Cultivos primarios adenohipofisarios de rata hembra fueron tratados con E2 (1-10-100 nM) e Ins (1-100-1000 ng/ml), solos o combinados por 60 min. En forma paralela se utilizó L-NMMA (0.1mM) un inhibidor de la óxido nítrico sintasa (NOS). Se valoró la proliferación de lactotropas por doble detección inmunocitoquímica de BrdU y prolactina y la expresión de la isoforma a del receptor estrogénico (RE), PKCepsilon, ERK1/2 total y fosforilada, NOS III, GCalpha 1 y beta1 y b actina por Western Blot. Análisis estadístico ANOVA-Tukey.
En condiciones libres de suero E2 no indujo proliferación celular, pero cuando se lo co-incubó con Ins, inhibió la actividad mitogénica promovida por este factor, efecto que fue revertido por L-NMMA (p<0.01). El tratamiento con E2, Ins o E2/Ins produjo un aumento significativo en la expresión del REa.
La expresión de PKCepsilon y ERK 1/2 fosforilada incrementó significativamente por acción de E2 o Ins, mientras que la co-incubación de E2/Ins redujo su expresión (p<0.001) en correlación con el efecto antimitogénico observado.
Con respecto a la vía NO/GC, E2 o Ins no indujeron cambios significativos en la expresión de NOS III, ejerciendo efectos opuestos sobre la expresión de las isoformas de GC (incrementaron alpha1 e inhibieron beta1). La co-incubación de E2/Ins indujo un aumento significativo de NOS III y de ambas isoformas de GC.
Estos resultados evidenciaron que el E2 es capaz de inhibir la actividad mitogénica inducida por Ins estimulando la vía NO/GC e inhibiendo la vía PKC/ERK1/2.
