Retinopatia diabética: caracterización de un nuevo modelo animal murino

PAZ, MC; SUBIRADA, P; RIDANO, ME; CASTRO, C; SANCHEZ, MC

Córdoba

Jornada; Mini-reunión de la Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología; 2015

Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO)

RETINOPATIA DIABETICA: CARACTERIZACIÓN DE UN NUEVO MODELO ANIMAL MURINOPaz, MC1; Subirada, PV1; Ridano, ME1; Castro, C2; Sánchez, MC1.1Departamento de Bioquímica Clínica, Facultad de Ciencias Químicas, UNC. CIBICI-CONICET, Córdoba, Argentina.2Laboratorio de Biología Vascular, Facultad de Ciencias Médicas, UNCuyo. IMBECU-CONICET, Mendoza, Argentina.La diabetes tipo 2, que constituye un síndrome metabólico (SM), desencadena a nivel retinal complicaciones microvasculares conocidas como retinopatía diabética (RD). Varios modelos animales de RD han sido estudiados pero ninguno ha podido reproducir en su totalidad esta patología. En este trabajo se propone caracterizar un modelo murino de RD que conjugue las alteraciones del SM y reproduzca las etapas observadas en humanos. Para ello se utilizaron ratones C57BL/6 (WT) y deficientes en Apolipoproteína E (ApoE-KO) alimentados con dieta normal (DN) o con dieta rica en fructosa (DF) (10%) suministrada en el agua de bebida a partir de los 2 meses (M). A los 8 M de edad se analizaron en sangre niveles de glucosa y lípidos y se realizaron estudios funcionales retinales (ERG). Sobre las retinas extraídas se realizaron análisis histoquímicos y de inmunofluorescencia (IF). Al tiempo evaluado tanto los ratones WT DF como los ApoE-KO DN y DF presentaron hiperglucemia y dislipemia, alteraciones significativas en la onda b del ERG y POs disminuidos en los ratones WT DF y ausentes en los ApoE-KO DN y DF, siendo revertidos bajo tratamiento con pioglitazona (20 mg/kg). El estudio histoquímico (flatmount) mostró una disminución en la densidad vascular en los ApoE-KO DN y DF y en el número de cél. musculares lisas (α-SMA) tanto en los ApoE-KO como en los WT DF. Al evaluar muerte celular, se observaron células TUNEL-positivas a nivel de la capa de CG en los WT DF, incrementando en los ApoE-KO DN y DF. Por IF se observó expresión de GFAP en astrocitos de WT DN, mientras que los WT DF mostraron además expresión en células de Müller activadas, siendo incrementada en los ApoE-KO DN y DF. Los resultados indican que al tiempo evaluado tanto ratones WT DF como ambos grupos ApoE-KO presentaron alteraciones compatibles con RD. Posteriores estudios permitirán caracterizar los mecanismos involucrados en el desarrollo de esta afección ocular en estos modelos animales.