Extracellular vesicles from cancer-associated fibroblasts stimulated by dietary compounds trigger cell proliferation in breast cancer cells

ÉRICA DANIELA SOLLA; FRANCO FABIÁN ROLDÁN GALLARDO; MAZO TAMARA; FERRERO VICTORIA; MARÍA EUGENIA PASQUALINI; AMADO ALFREDO QUINTAR

Buenos Aires

Workshop; I Annual Workshop of the Argentine Group of Extracellular Vesicles. September 15, 2023. Published in book of abstracts; 2023

Estudios sugieren asociación entre nutrición y desarrollo tumoral. Patrones dietarios con alimentos ricosen carbohidratos (PBA) y ácidos grasos saturados (PCS), representados principalmente por fructosa(F) yácido palmítico (AP), se asocia positivamente con el riesgo de cáncer colorrectal y de mama, aun nodilucidándose mecanismos celulares. El objetivo fue evaluar efectos de la dieta en interacciones delmicroambiente entre fibroblastos asociados al cáncer (CAFs) y células tumorales, mediadas por EVs.Ratones Balb/c alimentados 2 meses con PBA, PCS, o mezcla PBA+PCS se implantaron s.c. con células detumor mamario LM3 (20 días). Comparando con dieta Chow, tumores PBA+PCS crecieron más rápido ydesarrollaron mayor volumen(p<0,05). Por MET se vio mayor frecuencia de CAFs, colágeno y signosultraestructurales de aumento de secreción de EVs. In vitro, se cultivó la línea celular F88 de CAFsmamarios, estimulándose con F40mM, AP250uM, F+PA o sus vehículos 24h. Se aislaron EVs desobrenadantes por ultracentrifugación secuencial (2k, 10k, 100k), se caracterizaron por MET y semarcaron con CD63 utilizando la técnica de inmunooro. F+PA indujo aumento en la frecuencia de EVs de20-30nm con respecto a los controles o F y PA solos (p<0,05). Se estimularon células tumorales mamariasMCF-7 24h con medios acondicionados derivados de células F88 tratadas con F, AP y F+PA y con EVs deF88 tratadas igualmente. Medios acondicionados de F88 tratados con F+PA y EVs de F88 tratadas conF+PA aumentaron la proliferación celular de las células MCF7, determinado por incorporación debromodesoxiuridina y el recuento de células (p<0,05). Esta acción protumoral de EVs se inhibiópreincubando MCF7 con genisteína, sugiriendo captación independiente a clatrina. EVs de células F88tratadas con F+AP indujeron disminución en apoptosis celular, medida por citometría de flujo de anexinaV en células MCF-7 y MDA-MB-231. Estos resultados indican efecto patogénico de patrones dietéticosricos en F y PA en el microambiente tumoral mamario, a través de la liberación de EVs pro-proliferativaspor CAFs.