GONZALO MANUEL CASTRO
Congresos y reuniones científicas
Título:
Detección de bocavirus humanos en aguas residuales de Córdoba, Argentina, 2020-2021
Reunión:
Congreso; 2do. Congreso Provincial de Infectologia, Cordoba 2023; 2023
Resumen:
Introducción y objetivo. Los bocavirus humanos (HBoV) se describieron por primera vez en 2005-2010, identificados en secreciones respiratorias y materia fecal de niños. Se ha demostrado su distribución mundial y, según el análisis filogenético, se clasifican en los genotipos 1 a 4, agrupados en dos especies cuya nomenclatura oficial es Bocaparvovirus primate 1 (incluye HBoV1 y 3) y Bocaparvovirus primate 2 (HBoV2 y 4). El HBoV1 tiene relevancia clínica por ser responsable de infecciones agudas del tracto respiratorio superior e inferior, incluyendo cuadros graves, principalmente en lactantes (resfrío común, bronquiolitis, neumonía, sibilancias). Por otra parte, los HBoV2-4 se consideran bocavirus ?entéricos?. Todos ellos han sido detectados en materia fecal en proporciones variables y, recientemente, también en muestras ambientales. Actualmente se investiga la participación de HBoV2 en la producción de diarrea en la infancia. Por ello, su detección en aguas residuales puede contribuir a conocer la historia natural de la infección e indagar sobre su potencial aporte a la vigilancia ambiental y clínica. El objetivo de este trabajo fue investigar la presencia de HBoV en aguas residuales de la ciudad de Córdoba. Material y método. Se realizó un estudio retrospectivo, observacional, descriptivo. Se analizaron muestras de aguas residuales obtenidas durante 2020 y 2021 con periodicidad semanal, de la planta de tratamiento de aguas residuales Bajo Grande, la cual recibe el vertido del 51% de la población de la ciudad de Córdoba. Las muestras fueron concentradas y procesadas para la extracción automatizada de ácidos nucleicos (Bioer Technology). A partir de estos extractos se amplificó una región de 380pb del genoma de HBoV que codifica las proteínas de la cápside VP1/VP2 mediante nested-PCR con primers pan-bocavirus. Los productos se visualizaron en gel de poliacrilamida con tinción de plata. En las muestras con mayor cantidad de producto de PCR, los fragmentos obtenidos se purificaron y secuenciaron en ambos sentidos mediante la técnica de Sanger utilizando un secuenciador automático ABI 3500xL (Applied Biosystems) mediante un protocolo validado e implementado in situ. Las secuencias fueron alineadas por ClustalW y analizadas, junto con secuencias de referencia de los diferentes genotipos de HBoV disponibles en GenBank, empleando los programas MEGA v.11 (https://www.megasoftware.net/) e IQ-TREE v. 1.6.10 (http://www.iqtree.org/release/v1.6.10). La reconstrucción filogenética se realizó por el método Maximum Likelihood y bootstrap de 10000 réplicas.Resultados. Se analizaron 84 muestras de aguas residuales, 32 del año 2020 y 52 del 2021. Se detectó la presencia de HBoV en 34 (40,5%) de ellas, 19 (59,4%) correspondientes al 2020 y 15 (28,8%) del año 2021 (p=0,006). En general se detectó circulación de HBoV todo el año, con excepción de algunas semanas en la temporada de otoño. La frecuencia de detección mostró una tendencia de concentración en invierno y primavera en 2020, desplazada hacia el verano en 2021. Se secuenciaron 12 muestras positivas, las cuales agruparon en los clústeres de los genotipos HBoV2 (10 secuencias) y HBoV3 (2 secuencias).Discusión y conclusiones. Se reporta por primera vez en Córdoba, y en nuestro país, la identificación de los genotipos 2 y 3 de HBoV. Además, es la primera detección de bocavirus humanos en aguas residuales de Argentina. La distribución de las muestras positivas sugiere una amplia circulación de estos virus en la comunidad. Los resultados alientan a profundizar la pesquisa con el objetivo de ampliar la identificación de genotipos de HBoV y su investigación en materia fecal de niños y adultos.