RUBIANES MARÍA DOLORES
Congresos y reuniones científicas
Título:
Cuantificación de ADN sobre electrodos de carbono vítreo modificados con una dispersión de nanotubos de carbono en glucosa oxidasa.
Autor/es:
FABIANA A. GUTIERREZ, MARÍA D. RUBIANES Y GUSTAVO A. RIVAS.
Lugar:
Santa Fé
Reunión:
Congreso; VI Congreso Argentino de Química Analítica; 2011
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Químicos Ananlíticos
Resumen:
La inmovilización de biomoléculas sobre materiales nanoestructurados con el fin de conferirles propiedades de biorreconocimiento, ofrece excelentes perspectivas para el desarrollo de biosenosres. En este sentido los nanotubos de carbono (CNT) han sido ampliamente utilizados para la construcción de plataformas (bio)senosras debido a sus excepcionales propiedades estructurales, electrónicas y mecánicas. En esta comunicación se presnte una nueva estrategia para la cuantificación de diferentes ADNs basada en la adsorción selectiva de estos ácidos nucleicos sobre electrodos de carbono vítreo (GCE) modificados con una dispersión de CNT de pared múltiple en Glucosa Oxidasa (GOx) (GCE/CNT-GOx).
Se estudió la adsorción y la electrooxidación de homooligonucleótidos (dG)7, (dG)11, heterooligonucleótidos y ADN de timo de ternera de simple y doble hebra sobre GCE/CNT-GOx y de forma comparativa sobre GCE pulido. La adsorción se efectuó a potencial de circuito abierto y el "stripping" voltamperométrico se realizó previo cambio de medio en una solución de "buffer" acetato 0,020 M pH 5,00. La señal analítica se obtuvo a partir de la oxidación de los residuos guanina. Se discute la influencia de diferentes variables experimentales en la adsorción de los oligonucleótidos tales como el tiempo de acumulación y la influencia del número de bases guanina en la señal electroquímica resultante y la importancia de la biocompatibilidad entre GOx y el ácido nucléico.
Se observó una dependencia lineal entre la señal voltamperométrica y el tiempo de adsroción hasta los 7 minutos, tendiendo a un valor constante a tiempos mayores que 10 minutos. En esas condiciones los oligonuceótidos no se adsorben de manera detectable sobre GCE demostrándose la ventaja del uso de la plataforma GCE/CNT-GOx.
De esta forma, esta novedosa plataforma constituye una alternativa muy atractiva para la cuantificación sensible y selectiva de ácidos nucléicos a niveles sub-ppm, pudiendo ser aplicada también al estudio de otros bioanalitos relacionados.
Se estudió la adsorción y la electrooxidación de homooligonucleótidos (dG)7, (dG)11, heterooligonucleótidos y ADN de timo de ternera de simple y doble hebra sobre GCE/CNT-GOx y de forma comparativa sobre GCE pulido. La adsorción se efectuó a potencial de circuito abierto y el "stripping" voltamperométrico se realizó previo cambio de medio en una solución de "buffer" acetato 0,020 M pH 5,00. La señal analítica se obtuvo a partir de la oxidación de los residuos guanina. Se discute la influencia de diferentes variables experimentales en la adsorción de los oligonucleótidos tales como el tiempo de acumulación y la influencia del número de bases guanina en la señal electroquímica resultante y la importancia de la biocompatibilidad entre GOx y el ácido nucléico.
Se observó una dependencia lineal entre la señal voltamperométrica y el tiempo de adsroción hasta los 7 minutos, tendiendo a un valor constante a tiempos mayores que 10 minutos. En esas condiciones los oligonuceótidos no se adsorben de manera detectable sobre GCE demostrándose la ventaja del uso de la plataforma GCE/CNT-GOx.
De esta forma, esta novedosa plataforma constituye una alternativa muy atractiva para la cuantificación sensible y selectiva de ácidos nucléicos a niveles sub-ppm, pudiendo ser aplicada también al estudio de otros bioanalitos relacionados.
