IVERMECTINA INDUCE MUERTE CELULAR PROGRAMADA EN Giardia lamblia

Jornada; XXV Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2022

Giardia lamblia es un protozoario parásito unicelular que causa una infección conocida como giardiasis, que puede ser asintomática oprovocar una enfermedad aguda y en algunos casos crónica. La evidencia actual sugiere que la adaptación de este parásito representaun ejemplo extremo de evolución reductiva sin pérdida de función. Esta característica única de G. lamblia, sumada al hecho de que sugenoma esté completamente secuenciado y que todo su ciclo de vida puede ser reproducido in vitro, la convierte en un modelo idealpara estudiar diferentes mecanismos celulares, entre ellos, la muerte celular programada (MCP). Recientemente, en nuestro laboratorio,utilizamos ivermectina (IVM), un antiparasitario aprobado para nematodes, y observamos que tenía un efecto letal sobre los trofozoítosde Giardia a altas concentraciones. Debido a la escasa evidencia acerca de la existencia de un mecanismo clásico de MCP en esteparásito amitocondriado, decidimos estudiarlo utilizando como herramienta IVM. Así, tratamos a los trofozoítos de G. lamblia con unaconcentración de IVM de 80 μM e incubamos a las células durante 6, 12, 18 o 24 hs. A continuación, estas células se tiñeron conAnexina V (marcador de apoptosis temprana) y PI (ioduro de propidio; marcador de daño de la membrana, posiblemente apoptosis /necrosis tardía) y se chequeó la fluorescencia por microscopía confocal. Nuestros resultados sugieren que IVM podría inducir unmecanismo de apoptosis temprana a dosis no letales, determinado por la tinción con Anexina V y PI. Los efectos de la droga tambiénse analizaron por citometría de flujo, evaluando los trofozoítos luego de 12 hs de incubación con IVM 60 u 80 μM. Encontramos queel tratamiento con IVM 60 μM indujo la muerte por apoptosis tardía/necrosis (Anexina-V+ Ioduro de Propidio+) de alrededor del 16%de los parásitos, mientras que la incubación con la droga a 80 μM lo incrementó al 60%. Además, el tratamiento con IVM 60 uM indujola muerte por apoptosis temprana (Anexina-V+ Ioduro de Propidio-) de alrededor del 20% de trofozoítos. Estos hallazgos sientan lasbases que nos permitirán valorar el uso de IVM como una droga contra la giardiasis, considerando que los tratamientos actuales no sontotalmente efectivos y que la mayoría de los pacientes tratados con IVM no tienen efectos secundarios relacionados a la droga.