Cryptococcus neoformans incrementa la expresión de moléculas CMH II y la producción de TNF en eosinófilos de rata
Garro AP; Chiapello LS, Baronetti JL; Masih DT.
Facultad de Ciencia Químicas, Universidad Nacional de Córdoba, Argentina. CIBICI-CONICET. dmasih@mail.fcq.unc.edu.ar
En los mecanismos de defensa de las infecciones fungicas, la producción de TNF y óxido nítrico (NO) por células de la inmunidad innata son eventos cruciales para la resolución de la infección. Además, un aumento en la expresión en superficie de Moléculas del Complejo Mayor de Histocompatibilidad clase II (CMH II) en células presentadoras de antígenos es fundamental para el dasarrollo de una respuesta inmune adaptativa. Por otra parte, durante la infección experimental en ratas con Cryptococcus neoformans realizada en nuestro laboratorio, se ha observado la presencia de eosinófilos (Eo) en los granulomas que rodean a la levadura encapsulada. Sin embargo, se desconoce la función de estas células en la criptococosis. En base a esto nos propusimos estudiar los efectos que produce el hongo vivo sobre la activación de eosinófilos peritoneales de ratas Wistar, investigando la fagocitosis, expresión de moléculas CMH II, producción de NO y TNF.
Eosinófilos de ratas se purificaron de lavados peritoneales utilizando un gradiente de percoll de densidades 1090 y 1080, luego de la inyección de los animales con tioglicolato 4 días antes. Por otra parte, levaduras de C. neoformans fueron cultivadas en sabouraud líquido durante 24 h, lavadas y opsonizadas con un anticuerpo monoclonal anti-cápsula. Los Eo se cultivaron con las levaduras opsonizadas a
Los resultados muestran que a las 2 h de cultivo se observan levaduras en el interior de los Eo, indicando la capacidad de estas células para fagocitar levaduras opsonizadas. Además, luego de 22 h de cultivo se observó un aumento en la expresión de CMH II en la superficie de Eo incubados con las levaduras con respecto a Eo en medio solo (p < 0,006). En los sobrenantes de los cultivos se detectó un incremento en la producción de TNF y una disminución en los niveles de liberación de NO, respecto a los controles (p < 0,001 y p < 0,002, respectivamente).
Estos resultados indican que C. neoformans es fagocitado por Eo y estas células se activan liberando TNF y aumentando la expresión de CMH II. Sin embargo, el hongo inhibe selectivamente la liberación de la molécula microbicida NO. Estos resultados sugieren la participación de los eosinófilos en los mecanismos de defensa en la criptococosis y abren el camino para evaluar a estas células como posibles presentadoras de antígenos fúngicos.
