Activación de macrófagos (MØ) por el tratamiento subcutáneo de ratas con levaduras muertas por calor (LMC) de Cryptococcus neoformans.
Baronetti JL; Chiapello LS; Garro AP; Masih DT.
En infecciones humanas y experimentales con Cryptococcus neoformans se ha demostrado que la respuesta inmune innata, en particular la activación de MØ, constituye un mecanismo central en el control de la diseminación fúngica. Por otra parte, en un modelo de protección desarrollado en nuestro laboratorio, el tratamiento de ratas con LMC emulsificado en adyuvante de Freund completo (AFC), cuatro días previos a la infección intraperitoneal con C neoformans, resulta protectivo, pero el mecanismo por el cual se produce este fenómeno no ha sido dilucidado. Nuestro objetivo fue evaluar la activación de MØ peritoneales tras el tratamiento con LMC-AFC, que podría contribuir a la protección observada en nuestro modelo de protección. Para tal fin, ratas Wistar fueron tratadas subcutaneamente con LMC-AFC o AFC-PBS como control, y cuatro días después, la producción de citoquinas (IL12,TGFb) fue determinada por ELISA, además distintos marcadores de activación tales como ED2, CD86 y MHC II fueron evaluados a través de citometría de flujo. Por otra parte la funcionalidad de estos macrófagos fue determinada a través de su capacidad para fagocitar y matar a levaduras de C. neoformans en ensayos in vitro. Nuestros resultados demuestran que MØ de ratas tratadas con LMC-AFC poseen un aumento en ED2 (p<0,006) y CD86 (p<0,025), pero no de MHC II, con respecto a MØ de ratas controles. En relación a las citoquinas liberados por los MØ, se observó un aumento en la producción de IL12 (p<0,010) y una disminución en la producción de TGFb (p<0,002) con respecto a los controles. Por otra parte, MØ de ratas tratadas con LMC-AFC poseen una mayor capacidad para fagocitar (p<0,050) y matar (p<0,020) levaduras de C. neoformans, que los provenientes de ratas controles. Estos resultados indican que el tratamiento con LMC-AFC activa a MØ peritoneales, con aumento de IL12 y en su actividad fagocítica y anticriptococcica, lo cual podría ayudar a la protección observada en nuestro modelo de protección.
