Triiodotironina (T3) potencia la inmunidad antitumoral por inmunoterapia a base de Células Dendríticas (DCs) en un modelo murino de Cáncer de Colon. Evidencias del Rol de T3 en DCs humanas

Córdoba

Jornada; XX Jornada Anual Científica de la Sociedad de Endocrinología y Metabolismo de Córdoba (SEMCO); 2018

Sociedad de Endocrinología y Metabolismo de Córdoba (SEMCO)

Existe una estrecha interrelación entre el sistema inmune y el endócrino, y en particular con el funcionalismo tiroideo. La respuesta inmune es iniciada por exposición de antígenos (Ag) a células presentadoras de Ag profesionales: células dendríticas (DCs), quienes activan a los linfocitos T (LiT) direccionando respuestas inmunes adaptativas. Previamente demostramos que DCs de ratón expresan el receptor de hormonas tiroideas y que niveles fisiológicos de Triiodotironina (T3) estimulan la maduración de DCs y la habilidad de éstas de incremetar respuestas adaptativas tipo T helper 1(Th1) pro-inflamatoria y citotóxica (LiT CD8+). Estos efectos fueron explotados exitosamente en un modelo de vacunación antitumoral a base de DCs en un modelo de melanoma en ratón. Considerando el potencial de traslación de los resultados obtenidos a oncoterapéutica humana, los objetivos de este trabajo proponen: 1- validar los hallazgos previos en otro modelo murino tumoral de interés, y profundizar el estudio de la respuesta inmune adaptativa generada; y 2- iniciar el estudio del efecto de T3 en DCs humanas. Para los estudios murinos (1), se utilizó un modelo de carcinoma de colon que recibió vacunación antitumoral a base de DCs cargadas con Ag tumorales, en presencia (o no) de T3 (5nM). Los Ag tumorales fueron obtenidos por irradiación con luz UV de células de carcinoma de colon MC38, generando células apoptóticas y necróticas (MC38-Apo/Nec), analizadas por la expresión de Annexina V/7-AAD (citometría de flujo). Las DCs inmaduras (DCi), y estimuladas con T3 (DC+T3) fueron co-cultivadas con las MC38-Apo/Nec por 18 hs, luego se midió la producción de IL-12 intracelular y secretada (marcador de maduración funcional de DC, por citometría de flujo y ELISA, respectivamente). Los tumores se generaron por inyección s.c. de células MC38 en ratones C57BL/6, que recibieron vacunaciones con DC tratadas o no con T3 y Ag tumorales. Por otra parte (2), DCs humanas obtenidas por diferenciación de monocitos de sangre periférica de donantes sanos (con certificado de comité de ética) fueron expuestas a cultivo por 18 hs con T3 (5nM). El análisis estadístico de los datos se realizó por ANOVA-SNK. Los resultados obtenidos mostraron que: 1.a) DCs solas o co-cultivadas con las células MC38-Apo/Nec, y expuestas a T3 incrementaron la producción y secreción de IL-12, indicando una mayor activación funcional de DCs en presencia de la HT. 1.b) T3 potenció los efectos antitumorales de la vacunación a base de DCs cargadas con Ag tumorales en el modelo murino de carcinoma de colon, evidenciados por una reducción en el tamaño tumoral. 1.c) estos efectos se acompañaron de un incremento en la producción de LiT Th1 y citotóxicos CD8+ en el bazo (donde además aumentó el perfil Th17) y en el ganglio linfático drenante del tumor; así como también de una disminución de LiT regulatorios (Treg), generadores de tolerancia inmunológica. 2) T3 incrementó la activación funcional de DC humanas, evaluada por la producción de IL-12. Los resultados obtenidos validan el protocolo de vacunación antitumoral a base de DCs tratadas con T3 en presencia de Ag tumorales en un modelo murino tumoral de cáncer de colon y profundizan el estudio del perfil inmune adaptativo periférico generado en bazo y ganglio drenante del tumor, lo que provee de fundamentación a los resultados terapéuticos registrados. Estos resultados junto con la activación funcional de DCs humanas por T3 resultan alentadores hacia la posible traslación del modelo de vacunación antitumoral específica a base de DCs en presencia de la HT y Ag tumorales en oncoterapéutica humana.