AIASSA VIRGINIA
Congresos y reuniones científicas
Título:
Acumulación de Ciprofloxacina en Proteus mirabilis
Autor/es:
AIASSA, V.; BARNES, A.I.; ALBESA I
Lugar:
Rosario
Reunión:
Jornada; XIII Jornadas Argentinas de Microbiología; 2008
Institución organizadora:
Asociación Argentina de Microbiología
Resumen:
P. mirabilis es un bacilo Gram negativo, móvil, perteneciente a la familia
Enterobacteriaceae, considerado la segunda causa de infecciones del tracto
urinario (ITU) adquiridas en la comunidad. Ciprofloxacina (CIP) presenta alta
actividad frente a Enterobacterias y es excretada rápidamente por la orina
alcanzando altas concentraciones, por lo tanto es utilizada en ITUs. CIP actúa
sobre ADN-girasa o topoisomerasa IV inhibiendo su acción. El principal
mecanismo de resistencia a quinolonas son mutaciones en estas enzimas.
Alteraciones en la membrana externa y/o la membrana citoplasmática estarían
asociadas a una disminución en la acumulación de quinolonas provocando una
resistencia de bajo nivel. Es decir la permeabilidad juega un rol secundario en
la susceptibilidad y resistencia a quinolonas, no así las bombas de eflujo que
definen el nivel de acumulación de quinolonas en las bacterias.
Nuestro objetivo fue cuantificar la acumulación de CIP en P. mirabilis wild
type y sus variantes resistentes a este antibiótico.
Se estudiaron dos cepas de P.mirabilis wt (1 y 2) a partir de las cuales se
seleccionaron variantes resistentes (VR) a CIP (1X, 1Y, 2X y 2Y) mediante
pasajes sucesivos por concentraciones subinhibitorias del antimicrobiano
(0,0625 mg/L) y aislamiento en Agar Müeller Hinton con concentraciones
supra CIM de CIP (4 CIM y 6 CIM).
La acumulación de CIP se determinó mediante un ensayo fluorométrico
descrito por Chapman JS y Col.
Se observó que la cepa más sensible (1, CIM: 0,125mg/L) acumuló más ATB
que la de sensibilidad intermedia (2, CIM: 2mg/L). En las VR no hubo una
relación directa entre CIM y acumulación de ATB. Así, la cepa más resistente
1X (CIM: 16 mg/L) acumuló más CIP que la cepa menos resistente 1Y (CIM:
4mg/L). No se observó diferencia de acumulación de CIP entre 2 y 2Y (CIM:
8mg/L) mientras que 2X (CIM: 4mg/L) acumuló menos CIP que 2.
La acumulación de CIP como único mecanismo de resistencia no permitió
explicar la susceptibilidad de las cepas estudiadas a este antibiótico a pesar de
ser considerado un factor involucrado en la resistencia. Lo cual confirma que
este es un elemento que debe sumarse a otros factores tales como mutaciones
en la ADN-girasa y bombas de eflujo para determinar la resistencia de las
bacterias a las quinolonas.
Enterobacteriaceae, considerado la segunda causa de infecciones del tracto
urinario (ITU) adquiridas en la comunidad. Ciprofloxacina (CIP) presenta alta
actividad frente a Enterobacterias y es excretada rápidamente por la orina
alcanzando altas concentraciones, por lo tanto es utilizada en ITUs. CIP actúa
sobre ADN-girasa o topoisomerasa IV inhibiendo su acción. El principal
mecanismo de resistencia a quinolonas son mutaciones en estas enzimas.
Alteraciones en la membrana externa y/o la membrana citoplasmática estarían
asociadas a una disminución en la acumulación de quinolonas provocando una
resistencia de bajo nivel. Es decir la permeabilidad juega un rol secundario en
la susceptibilidad y resistencia a quinolonas, no así las bombas de eflujo que
definen el nivel de acumulación de quinolonas en las bacterias.
Nuestro objetivo fue cuantificar la acumulación de CIP en P. mirabilis wild
type y sus variantes resistentes a este antibiótico.
Se estudiaron dos cepas de P.mirabilis wt (1 y 2) a partir de las cuales se
seleccionaron variantes resistentes (VR) a CIP (1X, 1Y, 2X y 2Y) mediante
pasajes sucesivos por concentraciones subinhibitorias del antimicrobiano
(0,0625 mg/L) y aislamiento en Agar Müeller Hinton con concentraciones
supra CIM de CIP (4 CIM y 6 CIM).
La acumulación de CIP se determinó mediante un ensayo fluorométrico
descrito por Chapman JS y Col.
Se observó que la cepa más sensible (1, CIM: 0,125mg/L) acumuló más ATB
que la de sensibilidad intermedia (2, CIM: 2mg/L). En las VR no hubo una
relación directa entre CIM y acumulación de ATB. Así, la cepa más resistente
1X (CIM: 16 mg/L) acumuló más CIP que la cepa menos resistente 1Y (CIM:
4mg/L). No se observó diferencia de acumulación de CIP entre 2 y 2Y (CIM:
8mg/L) mientras que 2X (CIM: 4mg/L) acumuló menos CIP que 2.
La acumulación de CIP como único mecanismo de resistencia no permitió
explicar la susceptibilidad de las cepas estudiadas a este antibiótico a pesar de
ser considerado un factor involucrado en la resistencia. Lo cual confirma que
este es un elemento que debe sumarse a otros factores tales como mutaciones
en la ADN-girasa y bombas de eflujo para determinar la resistencia de las
bacterias a las quinolonas.
