El anión superóxido (O2-) puede reaccionar con sustratos biológicos por transferencia de electrones o por reacciones de oxidación, interaccionando directamente con numerosas componentes celulares como ADN, lípidos y proteínas. Se ha demostrado que este radical puede atacar compuestos sulfhidrilos formando radicales RS. y peróxido de hidrógeno (H2O2). El óxido nítrico y O2- pueden formar peroxinitrito (ONOO2) con la subsecuente liberación de radical hidroxilo, altamente reactivo. Tirón es un secuestrante de O2- utilizado para determinar el rol de las especies reactivas del oxígeno (ROS) en la modulación de una gran variedad de respuestas biológicas, mientras que el rol del alginato de sodio con respecto al estrés oxidativo no está definido.
Los objetivos del trabajo fueron evaluar la capacidad de cloranfenicol (CMP) de inducir la generación de radicales del oxígeno y del nitrógeno en bacterias comparando la respuesta frente a secuestrantes de ROS.
La determinación de óxido nítrico se realizó a través de la cuantificación de nitritos en cultivos overnight de Staphylococcus aureus ATCC 29213 y en Escherichia coli ATCC 25922 mediante la técnica de Griess, en presencia (4 y 32 mg/L) o ausencia de antibiótico (basal), con y sin tirón (acido 4,5-dihidroxi-1,3-benzeno disulfonico) 50 mM.
Para determinar el efecto del alginato de sodio (1%) en la generación de ROS estimulada por CMP, se utilizó la reacción de reducción Nitro Blue Tetrazolium (NBT).
En E.coli la generación de nitritos disminuyó 58% y 84% en presencia de 4 y 32 mg/L de CMP, respectivamente. Con el agregado de tirón se observó un incremento del 54% en la producción de nitritos con 4 mg/L de CMP.
En la cepa de <i>S.aureus</i>, la producción de nitritos disminuyó 60% en presencia de 4 mg/L y 39% con 32 mg/L. Con el agregado de tirón se observó un incremento del 31% en la producción de nitritos con 4 mg/L y un aumento del 13% con 32 mg/L de CMP.
En las cepas estudiadas, se observó un incremento en los niveles de ROS extracelulares a expensas de una disminución de los niveles intracelulares en presencia de alginato de sodio.
El metabolismo del óxido nítrico está asociado con la generación de O2- por parte de cloranfenicol; ya que la inhibición de este radical incrementó los niveles de nitritos en los géneros bacterianos estudiados.
El agregado de alginato de sodio disminuyó los niveles intracelulares de O2- generados por el antibiótico ejerciendo un efecto protector en la célula.
