Alfa2-Macroglobulina aumenta en una retinopatía inducida por síndrome metabólico en ratón

PAZ, MC; BARCELONA, P; VAGLIENTI, MV; SANCHEZ, MC

Cordoba (virtual)

Congreso; XIII Congreso de la Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO) 2021(virtual); 2021

Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología (AIVO)

α2-Macroglobulin increase in a retinopathy induced by metabolic syndrome in mouseα2-Macroglobulina aumenta en una retinopatía inducida por síndrome metabólico en ratónPaz, María Constanza1,5; Vaglienti, María Victoria2,3; Subirada, Paula3,4; Barcelona, Pablo2,3; Sánchez, María Cecilia2,3.1 Unidad de Investigación y Desarrollo en Tecnología Farmacéutica (UNITEFA)-CONICET, Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Nacional de Córdoba (UNC).2 Centro de Investigación en Bioquímica Clínica e Inmunología (CIBICI)-CONICET.3 Dpto. de Bioquímica Clínica, Facultad de Ciencias Químicas, UNC.4 Instituto de Investigación Médica Mercedes y Martín Ferreyra (INIMEC)-CONICET, UNC.5 Dpto. de Farmacología, Facultad de Ciencias Químicas, UNCmcpaz@unc.edu.arMetabolic Syndrome (MetSyn) is a complex disorder of metabolism that affects different organs including the retina, triggering retinopathies. These diseases present, in addition to vascular alterations, a progressive neuronal degeneration. In this sense, α2-Macroglobulin (α2-M) has been proposed as a mediator of neurotoxicity. Considering that the neurodegeneration precedes microvascular lesions in retinopathies, in this work, it was proposed to evaluate gene and protein expression of α2-M in a mouse model of MetSyn that exhibits signs of non-proliferative retinopathy, such as neuronal impairment and mild vascular alterations. C57BL/6 (WT) and Apolipoprotein E knockout (ApoE KO) mice fed with normal diet (ND) or 10% w/v fructose diet (FD) in drinking water from 2 months of age were used. After 4 months of diet retinal extracts were obtained for Western blot and qRT-PCR analysis. Data was statistically analyzed by two-way ANOVA and Bonferroni post-hoc (p ≤ 0.05). All experimental procedures will be carried out following the standards of The Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO) and the ethics committee of Chemical Sciences faculty. The results showed α2-M mRNA expression in mice retina and a significant increase of α2-M protein expression in retinal extracts of ApoE KO mice with both diets, thus α2-M is synthetized in the mouse retina and their expression is increased in mice with metabolic alterations. These results are more than encouraging and strongly support the initiation of studies that allow us to know the role of α2-M in early stages of retinopathy induced by MetSyn.El síndrome metabólico (MetSyn) es un complejo desorden del metabolismo que afecta diferentes órganos incluyendo retina, generando retinopatías. Estas patologías presentan, además de alteraciones vasculares, progresiva degeneración neuronal. En este sentido, α2-Macroglobulina (α2-M), ha sido propuesta como un mediador de neurotoxicidad. Considerando que la neurodegeneración precede a lesiones microvasculares en retinopatías, se propuso evaluar la expresión génica y proteica de α2-M en un modelo de MetSyn que presenta signos de retinopatía no proliferativa, tal como daño neuronal y alteraciones microvasculares leves. Se usaron ratones C57BL/6 (WT) y deficientes en Apolipoproteina E (ApoE KO) alimentados con dieta normal (ND) o dieta fructosa (FD) al 10% peso/volumen en el agua de bebida, a partir de los 2 meses de edad. Luego de 4 meses de dieta, se obtuvieron extractos de retina para análisis por Western blot y RT-PCR cuantitativa. Los datos fueron analizados por ANOVA dos vías y post-test de Bonferroni (p ≤ 0,05). Los procedimientos siguieron los estándares de The Association for Research in Vision and Ophthalmology (ARVO) y del comité de ética de la facultad de Ciencias Químicas. Los resultados mostraron expresión del ARNm en retina de ratones y aumento significativo en la expresión proteica de α2-M en extractos retinales de ratones ApoE KO alimentados con ambas dietas, por lo tanto α2-M es sintetizada en retina y su expresión aumenta en ratones con alteraciones metabólicas. Estos resultados son un fuerte sustento para iniciar estudios que permitan conocer el rol de α2-M en estadíos tempranos de retinopatía inducida por MetSyn.