El género Dalea
en Argentina está representado por tres especies y una variedad: D. boliviana
Britton, Dalea elegans Gillies ex
Hook. et Arn., D. elegans Gillies ex
Hook. et Arn. var. onobrychiodes
(Griseb) Barneby y D. leporina
(Aiton) Bullock.
Los estudios químicos llevados a cabo en las
raíces de D. boliviana, permitieron el aislamiento y dilucidación estructural de
tres prenilflavonoides no descriptos previamente: (2S)-5,2′-dihidroxi-6″,6″-dimetilcromeno-(7,8:2″,3″)-3′-prenilflavanona (PF), (2S)-5,7,2′-trihidroxi-8,3′-diprenilflavanona (DPF) y (2S)-5,7,2′-trihidroxi-5′-(1′′′,1′′′-dimetilalil)-8-prenilflavanona (8PF); junto a una cromeno flavanona de estructura
conocida, obovatina, que por primera vez se
informa en este género. Por otro lado se
realizó una revisión de las estructuras de flavonoides prenilados aislados
previamente de D. elegans en 1994 por
nuestro grupo de trabajo. Esta revisión permitió
observar, mediante técnicas de RMN 2D, que
los grupos prenilos asignados al C-6 del anillo A de las flavanonas informadas,
corresponden inequívocamente a derivados sustituidos en C-8 por lo que las estructuras 6-prenilpinocembrina (6P) y
Los estudios de actividad biológica de las
flavanonas preniladas aisladas de D.
boliviana y D. elegans fueron
dirigidos hacia la búsqueda de actividad antimicrobiana y/o capacidad de
potenciar dicha actividad mediante inhibición de mecanismos de resistencia en
microorganismos.
En los ensayos de actividad antimicrobiana, el
compuesto 8PP inhibió el crecimiento de la cepa de Candida albicans resistente (CaR
12-99) cuyo mecanismo de resistencia se denomina resistencia múltiple a drogas
(MDR), que se caracteriza por la sobreexpresión de proteínas de membrana que
transportan antifúngicos desde el interior de la célula, hacia el medio
extracelular. La evaluación de este mecanismo de resistencia, se realizó a través del análisis del eflujo del
fluorocromo rodamina 6G (R 6G) por bombas de eflujo tipo CDR. Para esto, se puso a punto una técnica de medición
de fluorescencia por citometría de flujo. El
compuesto 8PP fue evaluado entre 1 y 1000 µM, presentando inhibición del transporte de R6G, en forma dependiente
de la concentración en la cepa CaR
12-99, con una CI 50 de 119 µM. Al evaluar el crecimiento celular de esta
cepa resistente a fluconazol, se
observó la capacidad antimicrobiana de 8PP con CIM de 150 µM.
Por otro lado, al combinar distintas
concentraciones inhibitorias y sub-inhibitorias de este compuesto con
fluconazol, se revirtió la resistencia de esta cepa. Los datos son compatibles con una acción
dual del compuesto 8PP: como antifúngico y como inhibidor del mecanismo de resistencia
mediado por
transportadores de múltiples drogas (MDT) en una cepa resistente de C. albicans. Estos resultados nos permiten sugerir que la flavanona 8PP puede restituir la actividad de fluconazol en
cepas de C. albicans resistentes,
inhibiendo los transportadores de azoles.
El presente
trabajo contribuye al conocimiento de nuestra flora autóctona y sus
potencialidades como fuente de compuestos biológicamente activos, dirigiendo la
búsqueda de nuevas drogas, hacia
distintas problemáticas de la salud, con especial énfasis en la resistencia
microbiana.
