Adsorción de hexahistidina, como primera etapa en el diseño de superficies biofuncionales

LAURA E. VALENTI; CARLA E. GIACOMELLI

Vaquerías, Córdoba

Encuentro; II Encuentro de Física y Química de Superficies; 2006

Una estrategia que puede ser aplicada en el desarrollo de biosensores e inmunoensayos es inducir la interacción proteína-superficie vía seis residuos de histidina presentes en péptidos recombinantes. Estos residuos forman quelatos de alta afinidad con cationes metálicos como Ni (II) o Cu (II). La primera etapa para optimizar la interacción entre alguno de estos iones presentes en la superficie y los péptidos recombinantes, es conocer el mecanismo de adsorción-desorción de hexahistidina (His₆) en superficies sólidas.

El objetivo de este trabajo es estudiar el proceso de adsorción-desorción de His₆ sobre superficies sólidas desde tiempos cortos (segundos) hasta alcanzar estado estacionario, como función de la concentración del hexapéptido y del pH utilizando reflectometría. El proceso de adsorción está controlado por la interacción electrostática entre el His₆ y la superficie, mientras que el proceso de desorción también depende de las interacciones laterales entre las moléculas adsorbidas. Sobre la base de los resultados obtenidos, se determinó que las condiciones óptimas para obtener superficies biofuncionales son sintetizar el péptido recombinante con el His₆ fusionado en el amino-terminal de la molécula e inducir su adsorción a pH 8 y a bajos grados de cubrimiento. De esta manera, se obtiene una interacción fuerte y estable con orientación específica del péptido recombinante