CAMBIOS ESTRUCTURALES EN ALBUMINA POR INTERACCIÓN CON NANOPARTÍCULAS DE HIDRÓXIDOS DOBLES LAMINARES (LDH-NP)

VASTI, CECILIA; MARENGO VIADA, CORINA; GIACOMELLI, CARLA E.; ROJAS, RICARDO

El Calafate- Santa Cruz

Congreso; XXIII Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica; 2023

Introducción: Las nanopartículas de hidróxidos dobles laminares (LDH-NP) presentan múltiples aplicaciones en el campo de la biomedicina debido a su capacidad de intercambio aniónico, nula citotoxicidad, interacción con la membrana celular y consecuente capacidad de internalización1. Por otra parte, la interacción con proteínas específicas, como albumina sérica bovina (BSA), es un método eficiente para incrementar la estabilidad coloidal de las LDH-NP en condiciones fisiológicas, además de modificar su capacidad de internalización celular.Las interacciones entre LDH-NP y la BSA pueden explicarse por interacciones electrostáticas inespecíficas entre la superficie cargada positivamente de LDH-NP y la carga negativa de la proteína en condiciones de pH mayores que su punto isoeléctrico. Aunque existen numerosas publicaciones sobre la interacción entre proteínas y LDH-NP, poco se ha explorado sobre los cambios conformacionales que se producen en la proteína en dicho proceso. En este sentido, la fluorescencia es una herramienta relevante para elucidar los cambios conformacionales de las proteínas que contienen residuos de triptófano (W)2.Resultados: en este trabajo se explora el efecto de la interacción de BSA con LDH-NP sobre la estructura de la proteína. Se realizaron isotermas de adsorción, seguidas de determinaciones de tamaño y potencial zeta. El quenching estático de la fluorescencia por LDH-NP, así como la anisotropía de fluorescencia, indicaron el tipo de interacción producida entre LDH-NP y BSA. Por otra parte, se utilizó el desplazamiento de las bandas de W de la proteína adsorbida y quenching dinámico producido por inhibidores con diferentes propiedades (acrilamida y yoduro) para determinar los cambios conformacionales de la proteína en diferentes grados de cubrimiento superficial de LDH-NP. Finalmente, exploramos la capacidad de LDH-NP de estabilizar e inhibir la formación de fibras amiloides de la proteína amiloidogénica α-sinucleína (AS). Conclusión: la BSA mostró una alta afinidad por la superficie de la partícula, observándose importantes variaciones en los entornos de los residuos de W, que disminuyeron a medida que aumentaba el grado de cubrimiento, así como un efecto de quenching estático por parte de las LDH-NP. Tambien verificamos que LDH-NPs inhibe la formación de fibras amiloides de BSA y α-sinucleína (AS).