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UNIDAD TEMATICA |
Microbiología Básica: Bacteriología |
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E-mail del expositor |
jarce@fcq.unc.edu.ar |
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Institución |
Lab. de Higiene y Microbiología, Dto de Farmacia, Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Nacional de Córdoba. |
Los biofilm son comunidades de microorganismos unidos a superficies sólidas inmersas en una matriz extracelular. Ésta, no es sólida y presenta canales que permiten el flujo de agua, nutrientes y oxígeno incluso hasta las zonas más profundas, sin embargo, dentro del mismo pueden existir diferentes concentraciones de nutrientes, pH u oxígeno, aumentando la heterogeneidad sobre el estado fisiológico en el que se encuentra la bacteria dentro del biofilm. Además, cuando el biofilm crece en volumen, las bacterias del interior tienen menos acceso a los nutrientes, creando poblaciones bacterianas con diferentes metabolismos. El objetivo de este trabajo es comparar la capacidad de estimulación de especies reactivas del oxígeno (ROS) y óxido nítrico (ON) que presentan diferentes cepas de S. aureus formadoras de biofilm en distintas condiciones de cultivo: medio nutritivo básico como Caldo Tripteína Soya (CTS), medio reductor con Tioglicolato (TIOG), aerobiosis y microaerofilia, respectivamente. Se trabajó con tres cepas clínicas y una ATCC. La formación de biofilm se cuantificó por espectrofotometría (O´Tool & Kolter, 1998). Los metabolitos del oxígeno (ROS intra y extracelular) se determinaron por reducción Azul de Nitro Tetrazolium (NBT). Se utilizó la técnica de Griess para determinar los niveles de nitrito total producidos en sobrenadante de cultivo. En aerofilia hubo una mayor producción de biofilm en TIOG que en CTS, en todas las cepas ensayadas, posiblemente por el menor estrés oxidativo intracelular que mostraron las células en este medio; sin embargo se observó una mayor producción de ROS y ON en el sobrenadante de cultivo debido al microambiente reductor. En comparación, en microaerofilia la producción de biofilm fue menor en ambos medios de cultivo, siendo menor en CTS, con un importante incremento del estrés intracelular. Las especies extracelulares tanto de oxígeno como del nitrógeno mostraron un importe incremento en estas condiciones de cultivo en ambos medios.
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Cepa |
CTS - Aerofilia |
CTS - Microaerofilia |
TIOG - Aerofilia |
TIOG - Microaerofilia |
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1 |
0,307±0,017 |
0,287±0,043 |
0,565±0,203 |
0,363±0,095 |
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2 |
0,351±0,065 |
0,276±0,007 |
0,522±0,004 |
0,261±0,026 |
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3 |
0,252±0,003 |
0,230±0,030 |
0,436±0,076 |
0,283±0,018 |
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ATCC |
0,236±0,180 |
0,171±0,028 |
0,870±0,053 |
0,248±0,028 |
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Conclusiones
El desarrollo del biofilm de S. aureus se vio afectado por el alto estrés intra y extracelular que mostraron las cepas bacterianas por la disminución del oxígeno, pero fue favorecido por la presencia de un medio reductor donde el estrés intracelular fue notablemente menor.
