Autor/es:
ARCE MIRANDA J.E., ANGEL VILLEGAS N., BARONETTI J.L., RAVETTI S., ALBESA I., PARAJE M.G.
Resumen:
ESTUDIO DEL COMPORTAMIENTO DE BIOFILM DE Staphylococcus aureus
FRENTE A DIFERENTES CONCENTRACIONES DE PERÓXIDO DE HIDRÓGENO
(H2O2)
J.E. Arce Miranda, N. Angel Villegas, J.L. Baronetti, S. Ravetti, I. Albesa, M.G. Paraje.
jarce@fcq.unc.edu.ar
Dto. de Farmacia, IMBIV-CONICET, Fac. Ciencias Químicas, Universidad Nacional de
Córdoba. Haya de la Torre y Medina Allende. Cdad. Universitaria. CP. 5000.
El biofilm es una comunidad de microorganismos derivado de células sésiles que crecen unidas
irreversiblemente a una superficie sólida, viva o inerte. Existen antecedentes en nuestro grupo
que distintas condiciones ambientales modifican el biofilm y según nuestra hipótesis se
relacionaría estrechamente con el estrés oxidativo de las células sésiles del mismo.
Condiciones ambientales favorables como el agregado de glúcidos aumentó la formación del
biofilm disminuyendo notablemente el estrés, condiciones desfavorables, aumentaron el estrés.
El objetivo del presente trabajo fue estudiar el impacto de un estresor exógeno sobre las vías
metabólicas del oxígeno. Se utilizaron 3 cepas clínicas (1, 2 y 3) y una ATCC (N° 29213). Se
determinó por microtécnica la capacidad de formar biofilm con coloración de Cristal Violeta por
espectrofotometría a 595 nm. Se cuantificó Especies Reactivas del Oxígeno [reducción de Azul
de Nitro tetrazolio (NBT)]. Se midió Óxido Nítrico [técnica de Griess]. Se determinó enzimas
involucradas en la detoxificación oxidativa: Superóxido Dismutasa (ensayo con metionina,
riboflavina y NBT) y Catalasa (ensayo de Sinha). Se observó que la disminución del biofilm fue
inversamente proporcional a la concentración de H2O2. Se observó un aumento de las especies
reactivas del oxígeno tanto intra como extracelulares y un significativo aumento de las especies
del nitrógeno. Analizando el sistema antioxidante se observó a bajas concentraciones de H2O2
(5mM) un incremento en la actividad enzimática, disminuyendo a concentraciones elevadas
posiblemente por el agotamiento enzimático. La disminución en la formación del biofilms de S.
aureus estaría directamente relacionada al aumento del estrés, en este caso por el agregado
de un estresor exógeno.