Identificación y caracterización de un fragmento del dominio amino terminal de ZEB1 que induce la Transición Epitelio Mesenquimatosa (EMT)

LLORENS MARÍA CANDELARIA; CAVALLO, NATALIA; CABANILLAS, ANA MARÍA

Mar del Plata, Buenos Aires

Congreso; LIX Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2014

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

ZEB1 (Zinc Finger E-box binding Homeobox) factor de transcripción involucrado en la diferenciación celular, EMT y metástasis; EMT evento crucial en la progresión del cáncer y el desarrollo embrionario, se induce por factor de crecimiento transformante (TGFβ) en células epiteliales mamarias de ratón NMuMG. Nuestro objetivo fue caracterizar el rol funcional de un fragmento de ZEB1 de la región amino terminal (ZD1s), en el proceso de EMT en dicha línea celular. Las células NMuMG fueron transfectadas de manera estable con eGFPZD1s (NMuMGZD1s) o con el vector de expresión vacío eGFP (NMuMG-Vector) a modo de control. El análisis de inmunofluorescencia de la expresión de los filamentos de actina y E-cadherina, mostró una marcada disminución de las expresión de E-cadherina así como una localización subcelular citosólica en células NMuMG-ZD1s con respecto a las células control, de la misma manera la tinción cortical de actina fue alterada por la presencia de fibras de estrés. Coincidentemente el análisis de la expresión proteica por Western Blot mostró una marcada disminución de la expresión de E-cadherina en las células NMuMG-ZD1s con respecto a las células control, sin embargo la expresión de Vimentina no se modificó. La curva de crecimiento mostró una mayor tasa de proliferación en células NMuMG-ZD1s con respeto al control (NMuMG-Vector) y los ensayos de migración revelaron una mayor capacidad migratoria en células NMuMG-ZD1s con respeto al control. Todos estos cambios observados son característicos de células que están atravesando un proceso de EMT, por tal razón en este estudio mostramos que la sobre expresión de una fragmento de la región N-terminal de ZEB1 en células NMuMG es suficiente para inducir estadios tempranos de EMT, sin la necesidad de la intervención de TGFβ; también se logró determinar una región funcional de ZEB1 capaz de regular dichos cambios.