REGULACION DE ZEB1 POR IGF1R EN LA TRANSICIÓN EPITELIO MESENQUIMAL DE CELULAS NMuMG de EPITELIO MAMARIO MURINO?

LLORENS MARÍA CANDELARIA; VAGLIENTI VICTORIA

Mar del Plata

Congreso; LX Reunión de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2015

ociedad Argentina de Investigación Clínica

196) REGULACION DE ZEB1 POR IGF1REN LA TRANSICIÓN EPITELIO MESENQUIMATOSA DE CELULASNMUMG DE EPITELIO MAMARIO MURINO. Maria CandelariaLlorens12; Maria Victoria Vaglienti2; Ana Maria Cabanillas12 CIBICI1FAC.DE CS.QUIMICAS, UNIV. NAC. CORDOBA2ZEB1 (Zinc Finger E-box Binding Homeobox) es un factor detranscripción de la transición epitelio mesenquimatosa (EMT).Previamente identificamos un fragmento aminoterminal de ZEB1capaz de inducir EMT por si solo cuando es sobreexpresado encélulas epiteliales normales de mama de ratón NMuMG (NMuMGNZEB1).En el presente trabajo nuestro Objetivo es evaluar las víasde señalización capaces de regular la función de NZEB1 en el EMT.Células NMuMG-NZEB1 se trataron con activadores e inhibidoresespecíficos de vías por 48hs: DMSO, IGF1 10nM, EGF 50nM/mL,TGFb 5ng/mL, PMA 10ng/ml IONO 10ng/ml, Calphostin C 50 nM,LY294002 20 μM, PD98059 20 μM, UO126 20 μM, UO124 20 μM,NVP-AEW541 5μM y LiCl 50 mM. Los resultados de WB revelaron queninguno de los tratamientos revierten la disminuida expresión de ECadherinainducida por NZEB1 lo que sugiere que el estado defosforilación de este fragmento no es crítico para el rol de ZEB1 sobreEMT. Sin embargo, sólo NVP-AEW541(inhibidor de IGF1R) disminuyósignificativamente la expresión de N-ZEB1 (P<0.05). Esta últimacondición (NVP 5μM por 48 hs) se ensayo sobre otros marcadores deEMT como expresión y distribución de F-actina (Microscopía confocale IF) y capacidad migratoria (Wound Healing) e invasiva (invasión enMatrigel) de las NMUMG-NZEB1. Los resultados revelaron que estascélulas tratadas con NVP, presentan tendencia a reorganizar losfilamentos de actina de manera cortical, tipo epitelial-like, con unamarcada disminución en la migración e invasión respecto del control(P<0.001). A fin de evaluar la participación del proteasoma en el efectode NVP, las NMuMG-NZEB1 fueron tratadas con NVP-AEW541 5μMy/o MG132 5μM durante 48 hs. La presencia de MG132 revirtió elefecto de NVP con aumento de la expresión de N-ZEB1. Losresultados sugieren que la vía de IGF1R podría ser capaz de regularla expresión de NZEB1 y consecuentemente el proceso de EMT,mediante la regulación de la estabilidad proteica de dicho factor viaproteasoma.