Evaluación de condiciones de conservación de muestras de humor vítreo destinadas al análisis cuantitativo de etanol

Congreso; XXII Congreso Argentino de Toxicología. XXXVII Jornadas Interdisciplinarias de Toxicología. II Jornadas Iberoamericanas de Toxicología: ?Fortaleciendo el trabajo interdisciplinario?; 2021

Asociación Toxicológica Argentina

El humor vítreo (HV) es una matriz de elección para la determinación de etanol en cadáveres. Es limpio y poco susceptible a la contaminación y putrefacción. Permite distinguir entre la producción de etanol post-mortem del consumo ante-mortem y resulta ideal en casos de muertes traumáticas y cadáveres descompuestos, deshidratados, carbonizados o embalsamados. No obstante, el HV no está exento al efecto de condiciones pre-analíticas (toma, embalaje y conservación) que pueden conducir a un análisis cuantitativo de etanol erróneo, y en nuestro medio, no se disponen de guías estandarizadas para la correcta manipulación de esta matriz. El objetivo de este trabajo fue evaluar la estabilidad de muestras de HV y establecer las condiciones de temperatura y el tiempo óptimos para su resguardo desde que ingresa al laboratorio hasta su análisis. Para ello, tres pooles de muestras de HV con una concentración de etanol de 1,76; 0,68y 1,13 g/L, fueron fraccionados por triplicadoen jeringas sin cámara de aire (SCA) y en tubosplásticos con cámara de aire (CCA) y resguardadas a diferentes temperaturas: 23 °C (temperatura ambiente, TA), 4 °C y -20 °C, durante 30 días. La concentración de etanol se determinó en todas las muestras a tiempo 0, 7, 15 y 30 días mediante cromatografía gaseosa con detector de ionización de llama y auto-muestreador de head space, utilizando isopropanol como estándar interno. En las muestras SCA a TA, a los 7 días se evidenció una disminución de 3 % en los niveles de etanol con respecto a la concentración inicial, una pérdida de 15 %a los 15 días y de 26 % a los 30. A los 7 días no se observaron diferencias en las muestras resguardadas a 4 °C con respecto a TA, mientras que, a los 15 y 30 días, la pérdida a 4 °C fue inferior, de 8 y 7 % respectivamente. A -20 °C no se registró una disminución significativa en los niveles de etanol a los 7 y 15 días, evidenciado pérdidas inferiores al 10 % a los 30 días. Las muestras CCA mostraron porcentajes de pérdida de etanol superiores a las SCA en todas las condiciones de temperatura a los diferentes tiempos, llegando a niveles de etanol no detectables entre los 15 y 30 días a TA. Tanto las condiciones de temperatura y tiempo de resguardo afectan la determinación cuantitativa de etanol en HV y pueden llevar a resultados erróneos, con efectos más notables sobre muestras preservadas con cámara de aire. Si bien nuestros datos sugieren un resguardo de hasta 30 días a -20 °C sin cámara de aire para muestras de HV que no se analizan en el momento de su recepción, es importante destacar la necesidad de estudios futuros adicionales para determinar las condiciones óptimas de conservación y garantizar así, el correcto procedimiento pre-analítico para esta matriz destinada a la cuantificación de etanol