Contribución de la disfunción mitocondrial y del factor nuclear kappa b (nf-κb) al desarrollo de senescencia prematura durante la progresión tumoral hipofisaria experimental

MONGI BRAGATO BETHANIA; GRONDONA, EZEQUIEL; CARREÑO, LUCIA; SOSA, LILIANA D.V.; JUAN PETITI; GUTIÉRREZ, SILVINA; ALICIA TORRES; ANA L DE PAUL

La Falda

Congreso; 5to Congreso Argentino de Microscopía; 2018

Sociedad Argentina de Micrsocopía

En la población general son frecuentes los tumores hipofisarios, representando el 15% de los tumores intracraneales. Las características benignas de estos adenomas han sido asociadas al proceso de senescencia celular, fenómeno caracterizado por un potente arresto en el ciclo celular que puede ser desencadenado por diferentes estímulos siendo uno de ellos el estrés oxidativo. Junto al arresto celular, las células senescentes presentan un compromiso en la dinámica y metabolismo mitocondrial. En este sentido, se sabe que las especies reactivas de oxígeno (ROS) producidas a nivel de la mitocondria pueden activar al NF-κB, un factor de transcripción clave en el proceso de senescencia.Es ampliamente conocido el rol del estrógeno en la funcionalidad hipofisaria; sin embargo, un área novedosa de investigación es la referida a la acción de esta hormona sobre la funcionalidad mitocondrial y su contribución al desarrollo de senescencia hipofisaria. En relación a este proceso, es interesante destacar la existencia de múltiples puntos de convergencia en las vías de señalización del NF-κB y de los receptores estrogénicos en el control del ciclo celular. En base a estas evidencias, nos propusimos evaluarla la contribución de la disfunción mitocondrial, así como también el rol del NF-κB y su posible interacción con el receptor de estrógeno alpha (ERα) en el proceso de senescencia durante el desarrollo tumoral hipofisario. Ratas macho adultas Wistar se implantaron subcutáneamente con benzoato de estradiol (30 mg) durante 10, 20, 40 y 60 días (E10-60). Posteriormente, se analizó morfometría y morfología mitocondrial por Microscopía Electrónica de Transmisión (MET); formación de ROS por citometría de flujo; expresión de proteínas mitocondriales MFN 2, OPA-1, Drp1 fosforilada (Drp 1-p) y niveles de NF-κB por Western Blot. Se estudió la asociación ERα:NF-kB por inmunoprecipitación, inmunofluorescencia y MET en glándulas control y tumorales. El análisis estadístico se realizó con un test de ANOVA-Fischer (p <0,05).En E10 se detectó un incremento del número y del tamaño mitocondrial en paralelo con un aumento gradual en la expresión de Mfn 2, OPA-1 y Drp1-p, indicadores de fusión mitocondrial. Se observó un aumento en la producción de ROS como señal de estrés oxidativo. En consonancia, se evidenció un incremento significativo en los niveles de NF-κB nuclear en E20 y E40 conjuntamente con una significativa asociación entre dicho factor de transcripción y el ERα hacia E10 y E60. Estos resultados indican que durante el desarrollo tumoral hipofisario existe una pérdida de homeostasis mitocondrial y acompañada un aumento en ROS que probablemente explicaría los signos de estrés oxidativo, favoreciendo la activación del NF-κB. A su vez, la marcada interacción de este factor de transcripción con el ERα indicaría la retención parcial de NF-κB en el compartimento citoplasmático con el fin de controlar su función como un factor de transcripción, modulando así los mecanismos moleculares asociados con la proliferación y senescencia durante la progresión del tumor pituitario experimental a los fines de controlar el crecimiento tumoral.