EVALUACIÓN DEL TRATAMENTO COMBINADO DE CLOMIPRAMINA Y ANFOTERICINA-B SOBRE MACRÓFAGOS J774.A1 INFECTADOS CON Leishmania amazonensis

DIMMER JESICA; BARRIONUEVO CAMILA NEREA; DIMMER VANESA GABRIELA; KONIGHEIM BRENDA; AGUILAR JAVIER; RIVAROLA HECTOR WALTER

Encuentro; IV REUNIÓN CONJUNTA DE SOCIEDADES DE BIOLOGÍA DE LA REPÚBLICA ARGENTINA; 2020

SAB

Las Leishmaniasis son enfermedades provocadas por parásitos protozoarios del género Leishmania (Trypanosomatidae) e integran el grupo de las enfermedades infecciosas más desatendidas en el mundo. Los medicamentos empleados en la actualidad presentan numerosas desventajas como la toxicidad, alto costo y la duración del tratamiento. Una estrategia que se ha valorado en los últimos años es la combinación de medicamentos. Por un lado, Anfotericina B (Anf-B) es un fármaco que ejerce su acción leishmanicida interfiriendo en la permeabilidad de la membrana, produciendo lisis celular. Sin embargo, presenta serios efectos tóxicos. Por otro lado, Clomipramina (Clo) es un fármaco tricíclico que ha demostrado inhibición sobre la enzima tripanotiona reductasa exclusiva de Leishmania y T. cruzi. Esta enzima participa en el sistema de reducción de peróxidos, cuya inhibición permite la acumulación de residuos no reducidos produciendo efectos citotóxicos sobre el parásito. Se propuso como objetivo evaluar la efectividad del tratamiento combinado de Anf-B y Clo sobre macrófagos de la línea J774.A1 infectados con L. amazonensis. Para ello, se infectaron 2x105 macrófagos/pocillo con una proporción 1:5 de parásitos. Posteriormente, se realizó el tratamiento con las concentraciones de Clo (0,15 y 0,30 µg/mL) y Anf-B (0,5 y 1,0 µg/mL), ya sea individualmente o en combinación (n=3), y se incubaron durante 72 h. Se incluyó el control de infección sin tratamiento (CI) y el control sin infección. Finalmente, se realizó la tinción de Giemsa para determinar la tasa de infección (TI): total de amastigotes en macrófagos infectados por el porcentaje de infección. Los resultados indican que Clo a 0,30 µg/mL reduce la TI aproximadamente un 24%, mientras que Anfo-B a la concentración de 1,0 µg/mL reduce la TI aproximadamente un 40%, ambos respecto al CI (p<0,0001). La combinación de Anfo-B 0,5-Clo 0,30 µg/mL y Anfo-B 1,0-Clo 0,30 µg/mL lograron reducir aproximadamente el 75% la TI respecto al CI (p<0,0001), sin diferencias estadísticamente significativas entre ambos grupos (p>0,05), manteniendo la viabilidad celular de los macrófagos entre el 76 y el 92%. Por lo tanto, podemos concluir que los mecanismos de acción complementarios de Clo y Anf-B estarían potenciando el efecto leishmanicida, evitando los efectos letales sobre las células hospedadoras.