Terapia combinada in vitro de Anfotericina-B y Clomipramina sobre promastigotes de Leishmania amazonensis

BARRIONUEVO CAMILA NEREA; DIMMER JESICA; KONIGHEIM BRENDA; AGUILAR JAVIER; RIVAROLA HECTOR WALTER

Córdoba

Jornada; JIC XXII; 2021

FCM, UNC

La leishmaniasis es una enfermedad producida por parásitos del género Leishmania. Anfotericina-B (Anf) es uno de los principales fármacos utilizados para su tratamiento, sin embargo, se han reportado casos de toxicidad y resistencia. La búsqueda de nuevas terapias involucra la utilización de combinaciones de fármacos, que han demostrado ser efectivos para afecciones de similar biología patógeno-huésped y la identificación de blancos moleculares presentes en el parásito, pero ausentes en el huésped, como lo es la tripanotiona reductasa en Leishmania. Un fármaco inhibidor de esta enzima, es la clomipramina (Clo), empleado tradicionalmente por su acción antidepresiva. El objetivo de este trabajo fue analizar la terapia combinada ?in vitro? de Anf y Clo sobre promastigotes de L. amazonensis.Se incubaron 5x106 promastigotes/mL con concentraciones de los fármacos solos y combinados (Anf=0,02-0,62 μg/mL y Clo=0,48-7,8 μg/mL). Previamente, se demostró que estas concentraciones no fueron citotóxicas en células Vero (CV). Luego de 72 h, se realizó el recuento de parásitos y se determinó la concentración inhibitoria del 50% (CI50) y el Índice de Combinación (IC: IC>1 antagónico; IC=1 aditivo; IC<1 sinérgico). Por último, se realizó el isobolograma correspondiente a los valores de CI50 de cada uno de los fármacos y de sus combinaciones.Los valores de CI50 de cada fármaco fueron: Anf=0,18 μg/mL y Clo=6 μg/mL, siendo 103 y 21 veces menor que la concentración citotóxica en CV. De las concentraciones estudiadas, la combinación de Clo (0,48-7,8 μg/mL) con 0,02; 0,04 y 0,08 de Anf se ubicaron por debajo de la línea de aditividad, lo que indica un efecto sinérgico, coincidente con el valor obtenido de IC=0,61.Estos ensayos evidencian un aumento en el efecto antiparasitario a bajas concentraciones al emplear terapias combinadas, permitiendo reducir los efectos tóxicos sobre el huésped. El efecto sinérgico observado es coincidente con los resultados hallados en estudios previos en Trypanosoma cruzi y L. braziliensis.