Las respuestas intrínsecas a luz azul en las células gliales de Müller de aves implican la activación de opsinas y la liberación de calcio desde depósitos intracelulares.

MARCHESE, NATALIA A.; RIOS, MAXIMILIANO N.; MÓNACO, PAULA; GUIDO, MARIO E.

Workshop; V Reunión del Grupo ARgentino de Fotobiología; 2020

Grupo Argentino de Fotobiología

La retina de aves comprende diferentes fotorreceptores que participan en funciones no relacionadas a la formación de imágenes: las células ganglionares y horizontales que expresan Opn4 (melanopsina) y las células gliales de Müller (CM) que expresan las opsinas no visuales Opn3 (encefalopsina) y Opn5 (neuropsina), sensibles a luz azul y luz ultravioleta respectivamente (1, 2, 3, 4). Las CM son el principal tipo de célula glial de la retina de los vertebrados, situadas a lo largo de la retina interna y en estrecho contacto con todos sus tipos celulares controlan la fisiología retiniana mediante la fagocitosis de los desechos, la absorción de K+, el reciclaje de cromóforos y la liberación de factores tróficos y neurotransmisores (5). En este trabajo ahondamos la caracterización de las respuestas a la luz azul (BL) en cultivos primarios de CM de la retina en desarrollo, investigando las potenciales vías de fototransducción en estas células.Métodos: Los cultivos primarios de CM se prepararon a partir de retinas embrionarias de 8 días (E8) y se mantuvieron durante 2 semanas; los cultivos fueron estimulados por un pulso de BL de 20 seg. (LED de 68 µW/cm2) y las respuestas a la luz se evaluaron mediante microscopía de imágenes de fluorescencia de calcio con la sonda Calcium orange AM (5 µM) en presencia de diferentes tratamientos farmacológicos e inhibidores.Resultados: Una subpoblación de CM (45%) respondió a un pulso de BL (20 seg.) aumentando los niveles de calcio intracelular en más de un 20% respecto a sus niveles pre-estímulo. Esta respuesta no se observó en presencia del bloqueante inespecífico de opsinas hidroxilamina ni por estimulación con luz roja. Se realizaron más pruebas con el quelante de calcio extracelular EGTA y los inhibidores para los receptores de IP3 (2-APB). En estas condiciones, las respuestas a BL se mantuvieron en presencia de EGTA, mientras que disminuyeron con el tratamiento con 2-APB. Conclusiones: Nuestros resultados muestran una respuesta fótica directa y específica de las CM a la estimulación con BL que implica la activación de opsinas promoviendo la liberación de calcio desde depósitos intracelulares. Estas observaciones sugieren fuertemente nuevos roles para las CM en el desarrollo y la fisiología de la retina, posiblemente en los procesos visuales y no visuales regulados por la luz, así como también en la comunicación neurona-glia.