EFECTO PROTECTOR DE GLUTAMINA FRENTE A LA DISMINUCIÓN DE LA ABSORCIÓN INTESTINAL DE CALCIO DESENCADENADA POR MENADIONA.

BENEDETTO, MARIA MERCEDES; DIAZ DE BARBOZA, GABRIELA EDITH; TOLOSA DE TALAMONI, NORI GRACIELA

Córdoba

Jornada; XIII Jornadas de Investigación Científica de la Facultad De Ciencias Médicas.; 2012

Facultad De Ciencias Médicas, Universidad Nacional de Córdoba

Glutamina (GLN) es un aminoácido con propiedades antioxidantes y antiapoptóticas en diferentes tejidos expuestos a drogas pro-oxidantes. En trabajos previos de nuestro laboratorio se demostró que la administración de menadiona (MEN) disminuye la absorción intestinal de calcio mediante estrés oxidativo y muerte por apoptosis de células epiteliales duodenales. Los objetivos de este trabajo fueron estudiar la integridad funcional del duodeno mediante la evaluación de la absorción intestinal de Ca+2 luego del tratamiento con GLN y MEN, evaluar el papel de GLN frente al estrés oxidativo producido por MEN, y analizar el rol de GLN sobre el efecto proapoptótico ejercido por MEN en células duodenales. Para ello pollos Gallus gallus domesticus adultos recibieron 1g de GLN/Kg de peso corporal (pc) por vía oral y/o 2,5 μmol de MEN /Kg de pc por vía intraperitoneal (60 ó 90 min después). Las drogas actuaron en forma conjunta por 30 min. Los controles recibieron vehículo. La absorción intestinal de Ca+2 se midió por la técnica del asa intestinal ligada in situ. En homogeneizados de mucosa duodenal se determinó el contenido de glutatión total (GSH) y la actividad de las enzimas antioxidantes catalasa (CAT) y superóxido dismutasa (SOD), por métodos espectrofotométricos. La fragmentación del ADN se evaluó por TUNEL y la expresión de proteínas pro y anti-apoptóticas por inmunohistoquímica. Los resultados muestran que la administración de GLN 60 ó 90 min previos a la inyección de MEN previno la disminución de la absorción intestinal de Ca desencadenada por la quinona. El pretratamiento con GLN permitió el mantenimiento del contenido de GSH intracelular y de la actividad de las enzimas SOD y CAT en valores similares a los de los controles. El incremento del 30% en el número de células TUNEL positivas desencadenado por MEN se evitó por la administración previa de GLN en los tiempos estudiados. La determinación inmunohistoquímica de las proteínas pro-apoptóticas reveló que GLN bloquea el incremento en la expresión de citocromo c, Fas y FasL desencadenado por MEN en enterocitos. La inmunotinción para la molécula Bax no se modificó con los tratamientos de MEN ni de GLN. La expresión de las proteínas antiapoptóticas Bcl2 y calbindina D28k disminuyó después del tratamiento con MEN. La administración previa de GLN sólo impidió la disminución de Bcl2 desencadenada por la quinona En conclusión, GLN protege a los enterocitos del estrés oxidativo desencadenado por MEN mediante preservación de las defensas antioxidantes celulares como lo indican los niveles de GSH y las actividades de SOD y CAT. Probablemente, este efecto se deba al bloqueo de las vías apoptóticas extrínseca (mediada por Fas-FasL) e intrínseca (a través de citocromo c) y a la preservación de la expresión de la proteína antiapoptótica Bcl2. GLN ejercería así protección de la absorción intestinal de Ca+2, mediante mantenimiento del número de enterocitos con capacidad de absorción del catión.