ESTUDIOS PRELIMINARES DE OBTENCIÓN DE NANOCÁPSULAS LIPÍDICAS FUNCIONALIZADAS PARA LA VEHICULIZACIÓN DE BEVACIZUMAB

Córdoba

Congreso; Reunión Anual de la Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología.; 2017

Asociación de Investigación en Visión y Oftalmología.

El Bevacizumab (BVZ) es un anticuerpo monoclonal que se une e inhibe al factor estimulante endotelial vascular. Este fármaco es utilizado para el tratamiento de patologías oculares que presentan angiogénesis como la Degeneración Macular Relacionada con la Edad y la Retinopatía Diabética Proliferativa. Se administra por vía intravítrea y su principal desventaja es la necesidad de dosis repetidas. En este sentido, el desarrollo de sistemas que permitan un mayor tiempo de residencia del BVZ en su sitio de acción resulta interesante para la optimización de su terapia.En este trabajo se propone la funcionalización de Nanocápsulas Lipídicas (NCLs) para la carga de BVZ como una alternativa de tecnología novedosa para la vehiculización de esta biomolécula en un sistema portador.Se estudió la obtención de NCLs funcionalizadas por el método de post-inserción. Por una parte, 1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-N- [maleimide (polyethylene glycol) -2000] fue insertado en la superficie de las NCLs (NCLs-polímero) y, por otra parte, el anticuerpo fue funcionalizado con un grupo tiol. Finalmente, se llevó a cabo una reacción de acoplamiento entre el anticuerpo y el polímero, y el producto de reacción fue purificado por cromatografía de exclusión de tamaño molecular (CET). Las fracciones obtenidas fueron caracterizadas en tamaño medio de partícula (TMP) y, mediante técnicas espectrofotométricas, se identificó la presencia de lípidos y proteínas (Micro-BCA) con el objetivo de determinar las NCLs cargadas con BVZ (NCLs-BVZ) y anticuerpo libre. Como control se utilizaron BVZ libre, NCLs-polímero y, una mezcla de NCLs-polímero y BVZ no funcionalizado,A continuación, se exploró la obtención de las NCLs-BVZ a partir de diferentes cantidades iniciales de anticuerpo (1,5mg a 5mg). Las NCLs obtenidas fueron caracterizadas en TMP, índice de polidispersidad (IP) y potencial zeta (PZ).Los resultados relacionados a la CET mostraron la presencia de lípidos en las fracciones 13-18 y presencia de proteínas entre los intervalos de las fracciones 11-21 y 25-43. La capacidad de carga de BVZ en las NCLs aumentó conforme a la cantidad inicial de anticuerpo. Las NCLs-BVZ con 2,5mg iniciales de anticuerpo mostraron (94±5)% de acoplamiento, (196±13) nm de TMP, IP de 0,28 y PZ de (-19±4)nm.De acuerdo a estos resultados se puede inferir que esta técnica de acoplamiento permite la obtención nanopartículas con BVZ. Además, puede considerarse como una estrategia promisoria para el desarrollo de sistemas nanoparticulados que potencialmente podrán utilizarse para el tratamiento de enfermedades oculares del segmento posterior por vía intravítrea.