Fotosensibilización de nueva antraquinona natural inactiva al virus Herpes Simple Tipo-1

MUGAS L; KONIGHEIM BS; AGUILAR JJ; ROJAS L; JOSEAU J; CONTIGIANI MS; NÚÑEZ MONTOYA SC

Tucuman

Congreso; TERCERA REUNIÓN DE FOTOBIÓLOGOS MOLECULARES ARGENTINOS (III GRAFOB); 2016

Grupo Argentino de Fotobiología

A partir del estudio fitoquímico de Galium latoramosum Clos. (Rubiaceae), una especie herbácea nativa de Argentina y utilizada popularmente como tintórea1,2, se aisló un nuevo derivado antraquinónico identificado como 1-hidroxi-2-isobutoximetil-3-metoxiantraquinona (1). Teniendo en cuenta que algunas antraquinonas (AQs) han demostrado poseer actividad antimicrobiana, que puede ser incrementada con la luz3, el objetivo de este trabajo fue estudiar la capacidad de inactivación viral in vitro de 1, bajo oscuridad e irradiación.La estructura química de 1 (pureza 96,94%, según HPLC) se confirmó por sus datos espectrales. Los ensayos biológicos se realizaron sobre monocapa de células Vero, la viabilidad celular (VC) se midió por el método de captación de rojo neutro (RN)4. Mediante curvas de VC vs. concentración de 1, se determinó la concentración que afecta al 20 % de las células, definida como subtóxica (CSubT)5. La inactivación viral se evaluó sobre células Vero infectadas con Herpes simple Tipo 1 cepa KOS (HSV-1), las cuales se trataron con 1, a su CSubT. El tratamiento se sometió a dos condiciones distintas: oscuridad e irradiación (lámpara actínica 380-480 nm, Philips TL/03). El resultado de la inactivación se estableció por observación de las alteraciones morfológicas en las células (efecto citopático, ECP) a través de microscopia óptica6, y por determinación de la VC usando RN. Las partículas virales activas pos-tratamiento se detectaron por extracción de los contenidos extra e intracelulares y su posterior inoculación en una nueva monocapa de células, las cuales se evidenciaron en función de la VC de esta segunda monocapa.En oscuridad, las células infectadas tratadas con 1 mostraron ECP característico causado por HSV-1; y además, se determinó que esta AQ sólo consiguió inactivar el 22,91% de las partículas virales extracelulares y 36,79% de las partículas virales intracelulares. En contraste, las células infectadas tratadas con 1 bajo irradiación, evidenciaron un ECP distinto al causado por HSV-1, pero similar al ECP de las células no infectadas tratadas con 1; por lo tanto, este efecto es causado por la fotosensibilización de 1. Así mismo, bajo irradiación, se observó que 1 consiguió inactivar a las partículas virales extra e intracelulares en un 79,57 y 82,50%, respectivamente.En conclusión, la fotosensibilización de 1 logra inactivar aproximadamente el 80% de las partículas virales de HSV-1. Estos resultados nos motivan a profundizar los estudios de fotoestimulación, con el objetivo de proveer las bases para el desarrollo de nuevos tratamientos para lesiones de etiología viral.