Fotosensibilización de compuestos naturales: Antraquinonas antiherpéticas como posibles agentes para la terapia fotodinámica antimicrobiana

MUGAS L; KONIGHEIM BS; AGUILAR JJ; CONTIGIANI MS; NÚÑEZ MONTOYA SC

Sao Pedro

Congreso; O XXIV JORNADAS DE JÓVENES INVESTIGADORES, Asociación de Universidades Grupo Montevideo (AUGM); 2016

Universidade Estadual Paulista (UNESP)

Las antraquinonas (AQs) constituyen el grupo más numeroso de quinonas presentes en diversos géneros y especies vegetales, con una gran diversidad de efectos biológicos. Algunas AQs han demostrado actividad antiviral que es incrementada bajo la acción de la luz. Galium latoramosum Clos. (Rubiaceae) es una especie herbácea nativa de Argentina, utilizada popularmente para teñir, y pertenece a un género que se caracteriza por un alto contenido de AQs.Evaluar el efecto antiviral in vitro de derivados antraquinónicos aislados de Galium latoramosum sobre el virus herpes simple Tipo 1 (HSV-1).Los pigmentos de las raíces se extrajeron con solventes de polaridad creciente en un Soxhlet, siendo necesaria una maceración final con ButOH-AcOEt (8:2) para la extracción total de éstos. A partir de este último extracto, se aisló y purificó dos AQs aplicando distintas técnicas cromatográficas. La citotoxicidad in vitro de los extractos secos y de las AQs se evaluó sobre una monocapa de células Vero, empleando el ensayo de captación de Rojo Neutro. A través de curvas de viabilidad celular vs. concentración, se determinó la concentración citotóxica 50 (CC50), la concentración subtóxica (CSubT, CC80) y la máxima concentración no citotóxica (MCNC, CC90)6 de cada extracto y AQ. La actividad antiviral in vitro de las AQs se evaluó a su MCNC, frente al virus HSV-1 (cepa KOS), y los resultados se expresaron como porcentaje de inhibición de virus (%I). La citotoxicidad y el efecto antiviral de las AQs puras se determinó bajo dos condiciones distintas: oscuridad e irradiación (lámpara actínica 380-480 nm, Philips TL/03, λmax 420 nm).Dado que el extracto ButOH-AcOEt fue el más cito-tóxico, se inició su estudio químico sobre la base que un principio tóxico puede ser beneficioso al regular su dosis, especialmente cuando actúa como antimicrobiano. Así, se logró purificar dos nuevas AQs que fueron identificadas como: 2-carboxiisobutil-1,3-dihidroxi antraquinona (AQ1) y 1-hidroxi-2-isobutoximetil-3-metoxi antraquinona (AQ2). Establecimos que AQ2 (CC50= 43,46  0,69 µg/mL) es más citotóxica que AQ1 (CC50= 389,97  3,02 µg/mL), y este efecto es incrementado con irradiación (AQ2: CC50= 24,57  0,48 µg/mL y AQ1: CC50= 57,42  7,37 µg/mL).A la MCNC y en oscuridad, AQ1 inhibió más al HSV-1 (92,95  6,80%) que AQ2 (37,01  5,43%). El efecto de AQ2 a su MCNC se mejoró por acción de la luz, ya que logró aumentar la inhibición de las partículas virales extracelulares (79,56  2,49%) como intracelulares (82,50  3,11%).El estudio químico de G. latoramosum permitió aislar dos nuevas AQs con actividad antiherpética in vitro. Se determinó que AQ2 logra aumentar la inactivación viral a través de un proceso de fotosensibilización. Esto nos motiva a profundizar los estudios de estas AQs, con el fin de proveer las bases para el desarrollo de tratamientos alternativos, como la fotoinactivación antimicrobiana.