Regulación de las propiedades de unión a membrana de proteínas aciladas utilizando un inhibidor halogenado

PEDRO M.P.; VILCAES A.; TOMATIS V.M.; OLIVEIRA R.G.; GOMEZ G.A.; DANIOTTI J.L.

La Falda

Jornada; XIX Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2013

Sociedad de Biología de Córdoba

La unión de palmitatos a residuos cisteínas de proteínas a través de enlace tioéster (S-acilación) es una modificación post-traduccional reversible que constituye un importante mecanismo de asociación de proteínas periféricas a endomembranas. La S-acilación y la deacilación son catalizadas por aciltransferasas (PATs) y aciltioesterasas (APTs), respetivamente. El 2-bromopalmitato (2-BP) es un análogo halogenado de ácido palmítico comúnmente usado para inhibir la palmitoilación a nivel celular. Sin embargo, resultados preliminares sugerían que 2-BP también podría tener efectos sobre el proceso inverso (deacilación). Por este motivo, investigamos el efecto de 2-BP en la maquinaria de acilación/deacilación in vivo e in vitro. Se observó que 2-BP, además de inhibir la actividad PAT in vivo, afectó el ciclo de acilación de GAP-43 a nivel de la depalmitoilación, así como la cinética de asociación a membranas de proteínas mono y diaciladas. In vitro, 2-BP fue capaz de inhibir la actividad enzimática de APT1 y APT2 purificadas. Además, no se observó preferencias de APTs sobre sustratos en estado monomérico o micelar, resultado de significativa relevancia biológica. Los resultados indican que es factible regular la función y propiedades de unión de proteínas aciladas a membranas mediante condiciones controladas de tratamiento con el inhibidor 2-BP.