Identificación de actividad gangliósido glicosíltransferasas en la superficie celular

TORRES DEMICHELIS V.A.; CRESPO P.M.; DANIOTTI J.L.

Huerta Grande, Córdoba, Argentina

Jornada; XVII Jornadas Científicas de la Sociedad de Biología de Córdoba; 2009

Sociedad de Biología de Córdoba

Las gangliósido glicosiltransferasas son enzimas integrales de membrana localizadas principalmente en el complejo de Golgi. El objetivo de este trabajo fue analizar la distribución y actividad enzimática de gangliósido glicosiltransferasas (SialT2, GalNAcT y GalT2) en compartimientos subcelulares diferentes al complejo de Golgi. Mediante técnicas de expresión ectopica, marcación metabólica, inmunocitoquímica y microscopía confocal demostramos en células CHO-K1 y SK-Mel 28 que: I) SialT2 y GalNAcT, pero no GalT2, localizan en membrana plasmática (MP); II) SialT2, pero no GalNAcT, posee actividad enzimática en MP; III) Determinantes moleculares presente en el dominio catalítico de SialT2 son necesarios para su transporte y localización en MP; IV) El transporte de SialT2 a MP es independiente de la presencia de su sustrato (GM3); V) La actividad SialT2 en MP disminuye significativamente cuando se inhibe el transporte vesicular; VI) SialT2 endógena cataliza síntesis de producto (GD3) en MP de células SK-Mel 28. Los resultados demuestran la existencia de mecanismos de síntesis local que modulan la expresión de glicolípidos en la superficie celular.