Caracterización de vesículas extracelulares producidas por células dendríticas expuestas a triiodotironina. Rol en la amplificación de la señal inmunoestimulatoria

NEGRETTI BORGA, DANA MARÍA; BRAVO MIANA, ROCÍO M.; SOLER, MARÍA FLORENCIA; DE PAUL, ANA L; BLANCO, ANTONELLA; MONTESINOS, MARÍA DEL MAR; DONADIO, ANA CAROLINA; PELLIZAS, CLAUDIA G

Cordoba

Congreso; II Congreso Científico Profesional de Bioquímica.; 2019

Facultad de Ciencias Químicas-Universidad Nacional de Córdoba

INTRODUCCIÓN: La 3,5,3´-triiodotironina (T3) induce lamaduración de Células Dendríticas (DCs) y su activaciónfuncional, direccionando la respuesta inmune adaptativa haciaun perfil Th1 (producción de IL-12), Th17 y citotóxico, in vitro ein vivo.OBJETIVO: Caracterizar Vesículas Extracelulares (EVs) producidaspor DCs (EVs-DCs) tratadas con T3 (y controles) y estudiardel rol de éstas sobre DCs inmaduras singénicas (DCi).MATERIALES Y MÉTODOS: Se diferenciaron DCs de ratones(C57BL/6) y se incubaron con T3 (10 nM), o no (control), durante18h. Mediante ultracentrifugación se obtuvieron EVs 2K, 10K y100K. Se caracterizaron morfométricamente por MicroscopíaElectrónica de Transmisión y Dispersión Dinámica de la Luz.Mediante Western Blot determinamos marcadores proteicos(CD9, CD81). Se diseñó un ensayo funcional para evaluar elperfil inducido por EVs-DCs (T3 y control) sobre DCi (marcadoresfenotípicos: CD11c, MHCII, CD86; Citoquinas intracelulares:IL-12) mediante citometría de flujo. Análisis estadístico: Dunn?sMultiple Comparisons y Mann Whitney tests. Se consideróp<0,05 estadísticamente significativo.RESULTADOS: Las EVs-DCs presentaron morfologías, tamaños ymarcadores proteicos característicos. Las EVs-DCs 10K y 100K(T3 y control) activaron DCi (aumento de IL-12). El mismoefecto se observó tratando con 2K-T3, pero no por 2K-control.DISCUSIÓN: Se describe por primera vez la participación deEVs-DCs como mediadoras en la amplificación de las señalesinducidas por T3 sobre DCi, con impacto en el inicio de lainmunidad adaptativa.CONCLUSIÓN: Se caracterizaron EVs-DCs-T3. Los resultadossugieren que las EVs-DCs se modificarían diferencialmenteluego del estímulo con T3, amplificando la respuesta proinflamatoriainducida por la hormona sobre DCi.