Rol inmunomodulador de la vía de señalización mediada por esfingolípidos en los efectos de Triiodotironina en el inicio de la respuesta inmune

Congreso; XXIV Jornada Anual Científica de la Sociedad de Endocrinología y Metabolismo de Córdoba (SEMCO); 2022

Sociedad de Endocrinología y Metabolismo de Córdoba (SEMCO)

Introducción: El sistema endócrino es una compleja red de comunicación que regula la homeostasis del organismo en conjunto con los sistemas inmune y nervioso. Nuestro grupo de investigación demostró la existencia de receptores de Hormona Tiroidea (TR) en Células Dendríticas (DCs), células presentadoras de antígeno profesionales y directoras de respuestas inmunes adaptativas. Los efectos de Triiodotironina (T3), la Hormona Tiroidea (HT) biológicamente activa, en DCs murinas se desencadenan principalmente por mecanismos no genómicos que involucran al TRβ, Akt y NF-kB. La T3 induce la maduración de DCs y su activación funcional, direccionando la respuesta inmune adaptativa hacia un perfil Th1 (producción de IL-12), Th17 (producción de IL-17) y citotóxico, in vitro e in vivo. La vacunación antitumoral a base de DCs estimuladas con T3 (DC-T3) se aplicó con éxito en modelos murinos de melanoma y carcinoma de colon. Por su parte, los esfingolípidos son lípidos bioactivos que actúan como mediadores de vías de señalización intracelulares. La ceramida, esfingosina, esfingosina-1-fosfato (S1P) y las enzimas involucradas en su síntesis, han surgido como mediadores de señalización intracelular en eventos fisiopatológicos. La esfingosina quinasa (SK) y su producto S1P se han implicado ampliamente en procesos inflamatorios, de envejecimiento y tumorales, entre otros. SK cataliza la fosforilación de esfingosina a S1P y existe en dos isoformas, SK1 y SK2. Ha sido demostrado además que los esfingolípidos están involucrados en los efectos directos de las HTs a nivel de células T. Aunque esta vía está implicada en muchas condiciones proinflamatorias, se conoce poco sobre su papel en las células inmunitarias innatas como las DCs, menos aún por efecto de T3.Objetivo: Nuestro objetivo fue evaluar el rol de SK1 en la maduración y activación de DCs mediada por T3.Materiales y Métodos: Las DCs obtenidas a partir de precursores de médula ósea de ratones C57BL/6 wild type (WT) o SK1 knock out (KO)se estimularon (o no) con T3 (10 nM). El inhibidor de SK1 (PF-543, 100 nM) se agregó a las DCs WT en cultivo y luego de 30 min se estimuló con T3 (PF-T3-DCs) por diferentes tiempos. La relación entre Akt-fosforilado (p-Akt) y Akt total se analizó mediante Western Blot a los 30 min. La viabilidad se analizó mediante citometría de flujo (FACS)luego de 18 h. La citoquina IL-12 producida y secretada por las DCs se midió por FACS y ELISA (18 h), respectivamente. Análisis estadístico: ANOVA/Tukey y test t apareado. p<0,05 fue considerado estadísticamente significativo.Resultados: Nuestros resultados indican que PF-543 no modificó la viabilidad de DCs. Por su parte, observamos que la secreción de IL-12 aumentó en PF-T3-DCs provenientes de ratones WT luego de 18 h de exposición (vs T3-DCs, p< 0,005). A su vez, la inhibición de SK1 redujo p-Akt (PF-T3-DCs vs. T3-DC, p< 0,005). Finalmente, y en consonancia con la inhibición química de SK1, la producción intracelular de IL-12 aumentó en T3-DCs de ratones SK1-KO luego de 18 h de estímulo (vs WT, p< 0,0001). Conclusión: Los resultados presentados en este trabajo sugieren que la vía intracelular mediada por esfingolípidos está involucrada en la activación de T3-DCs. La inmunomodulación ejercida por SK1 sobre T3-DCs refuerza el rol de la vía intracelular de señalización a través de esfingolípidos en los mecanismos involucrados en la interrelación de los sistemas endócrino e inmune, con una novel participación de esta vía en el efecto de las HTs sobre el sistema inmune innato. En particular, aquí demostramos que SK1 generaría un efecto inmunomodulatorio sobre T3-DCs, ya que ante la inhibición de SK1 aumenta la respuesta proinflamatoria de las T3-DCs, con producción y secreción aumentada de IL-12. Nuevas investigaciones están en proceso para comprender el proceso de señalización y profundizar su rol en la activación de la respuesta inmune adaptativa.