EFECTO DEL ÁCIDO NITRO-OLEICO FRENTE A ESTRÉS OXIDATIVO Y GLIAL EN CÉLULAS DE MÜLLER

VAGLIENTI, MARIA V.; RIDANO, MAGALI E.; SUBIRADA, PAULA V.; PAZ, MARÍA C.; BARCELONA, PABLO F.; BONACCI, GUSTAVO; SANCHÉZ, MC

Córdoba

Congreso; II Congreso Científico Profesional de Bioquímica 2019; 2019

Facultad de Ciencias Químicas UNC

INTRODUCCIÓN: La patogénesis de la retinopatía diabética es multifactorial, incluyendo cambios proinflamatorios, estrés oxidativo y nitrosativo, entro otros. Cambios metabólicos durante la diabetes alteran la barrera hemato-retinal, permitiendo la extravasación de proteínas plasmáticas como α2-macroglobulina (α2M). En nuestro laboratorio demostramos que α2M induce reactividad glial, mediada por el incremento en los niveles proteicos de GFAP en células de Müller. En los últimos años ha sido demostrado que los ácidos grasos-nitrados (NO2-FA), son antiinflamatorios y citoprotectivos, debido a la activación de la vía antioxidante Keap1-Nrf2, entre otras.OBJETIVO: Determinar si el NO2-OA podría ser beneficioso a nivel retinal frente a estrés oxidativo y reactividad glial.MATERIALES Y MÉTODOS: Niveles de ROS fueron determinados con la sonda DCF-DA, por citometría de flujo, en células gliales MIO-M1 tratadas o no con NO2-OA (6h) previo al estímulo con PMA (1μM) o LPS (1μg/ml) (30min) (N=2). Niveles de expresión proteica de GFAP, Vimentina y HO-1 (estrés glial), fueron medidos por WB (N=2). Para ello células MIO-M1 fueron tratadas o no con NO2-OA (30min) previo al estímulo con α2M (2, 4 y 6h). Los datos fueron analizados utilizando ANOVA de una vía seguido por el test de Dunnett.RESULTADOS: Tanto PMA como LPS aumentaron significativamente los niveles de ROS comparados con el control (p<0.001) y el tratamiento previo con 5 μM de NO2-OA previno el aumento (p>0,05). Del mismo modo, el tratamiento con NO2-OA (30 min) previo a las 6 h de estímulo con α2M redujo los niveles de GFAP y vimentina a niveles del control (p> 0,05). Además de este efecto, α2M también aumentó los niveles de ROS en comparación con el control (p <0.05) y el tratamiento previo con NO2-OA evitó el incremento de ROS (p> 0,05).CONCLUSIÓN: Estos resultados indican que el NO2-OA puede actuar como un antioxidante protegiendo a las células del daño oxidativo y el producido por α2M.