Nanopartículas de plata biosintetizadas: análisis del daño oxidativo en macromoléculas de Staphylococcus aureus y Escherichia coli.

MELISA DE LOS ANGELES QUINTEROS; VIVIANA CANO ARISTIZÁBAL; MARIA GABRIELA PARAJE; PAULINA L PÁEZ

Córdoba

Congreso; Nanociencia y Nanotecnología para el desarrollo; 2017

En los últimos años son innumerables los avances que se han realizado, en el área de la medicina, sobre la excelente actividad antimicrobiana de nanopartículas de plata en diferentes géneros bacterianos [1], sin embargo el mecanismo por el cual ejercen su acción todavía se encuentra en vías de estudio. Ya es de amplio conocimiento que el estrés oxidativo se encuentra involucrado en la toxicidad de diferentes antibióticos [2]. En resultados previos (Quinteros etal.2016 [3]), observamos como nanopartículas de plata biosintetizadas que tenían actividad antibacteriana, generaban un aumento de especies reactivas del oxígeno y del nitrógeno en diferentes géneros bacterianos, siendo los posibles responsables de su toxicidad y de la muerte bacteriana. Por ello, nos propusimos ahondar en el mecanismo de acción de nanopartículas de plata, mediante la determinación de marcadores de estrés oxidativo como son la oxidación deproteínas, lípidos y el ADN así como también en las modificaciones en el potencial de membrana en Staphylococcus aureus ATCC 29213 y en Escherichia coli ATCC 25922. Para ello, se cuantificaron mediante técnicas espectrofotométricas, la oxidación de proteínas mediante la determinación de productos proteicos de oxidación avanzada (AOPP) y la presencia del malondialdehido (MDA) para el caso de la peroxidación lipídica. Mediante utilización de la sonda 8-ANS se determinó la alteración en la membrana plasmática en presencia de nanopartículas. La oxidación del ADN se determinó por HPLC utilizando como testigos losnucleosidos no oxidados y oxidados (dG y 8-OHdG). Se pudo observar que para ambas cepas hubo un aumento considerable de AOPP, MDA y 8-OHdG en presencia de nanopartículas. En las mediciones del potencial de membrana, se encontró que se produjeron modificaciones en el potencial de membrana de ambas cepas, viéndose un aumento de la fluorescencia para el caso de E. coli y una disminución de la fluorescencia para el caso de S. aureus. Con los resultados obtenidos, estamos realizando un gran aporte acerca del mecanismo por el cual las nanopartículas de plata ejercen su toxicidad en dos géneros bacterianos de gran importanciaclínica