La estimulación de TLR2 induce autofagia y modula la muerte celular inducida por fludarabina en células de leucemia linfática crónica.

ARROYO, DS; BUSSI, C; PERALTA RAMOS, JAVIER MARÍA; RODRIGUEZ, CM; IRIBARREN, P

Córdoba

Jornada; 2° Jornada de Docencia, Investigación y Extensión del Hospital Nacional de Clínicas-UNC. Córdoba.; 2018

HNC-UNC

La Leucemia Linfática Crónica (LLC) es una enfermedad caracterizada por una proliferación clonal de linfocitos B CD5+ en médula ósea, sangre periférica (SP) y órganos linfoides periférica. Esta enfermedad es heterogénea y presenta un curso clínico altamente variable. El diagnóstico de los pacientes generalmente se realiza en estadios tempranos, aunque alrededor del 40% de ellos progresarán a estadios clínicos más avanzados con necesidad de terapia.Dentro de los procesos patológicos en humanos, el cáncer fue uno de los primeros en vincularse a la autofagia ya que se detectaron deleciones monoalélicas de Beclin-1, proteína activadora de esta vía, en 40-74% de casos de pacientes con cáncer de mama, ovario y próstata. Este mecanismo es capaz de permitir a la célula neoplásica responder a cambios en las condiciones del medioambiente como la deprivación de nutrientes, prolongando su sobrevida. En sentido contrario, puede inducir la muerte celular a través de una excesiva autodigestión y activación de la apoptosis, inhibiendo así la progresión del tumor. Puesto que la autofagia regula procesos fundamentales que pueden determinar el destino de la célula cancerosa, resulta de gran interés realizar estudios para dilucidar si dicha vía participa en la progresión de LLC y de este modo proyectar su explotación para el desarrollo de nuevas estrategias terapéuticas en cáncer. En este sentido, números reportes han destacado la importancia de la vía de mTOR (mammalian target of rapamycin) en cáncer, particularmente la activación oncogénica de esta vía de señalización induce procesos requeridos para la proliferación de células tumorales. mTOR integra múltiples vías de señalización extracelular e intracelular que participan en el crecimiento y proliferación celular, así como en autofagia y senescencia. El objetivo general de nuestra línea de investigación es estudiar la vía autofágica en LB de pacientes con LLC y determinar si su modulación tiene algún efecto en la sobrevida de LB estimulados con agentes terapéuticos utilizados en pacientes con LLC. Se realizaron ensayos preliminares, cultivando células mononucleares purificadas de SP de pacientes con LLC (PBMC), con PP242, el cual es un inhibidor farmacológico de mTOR y por consiguiente, un potente inductor de autofagia. A partir de estos cultivos se evaluó la inducción de autofagia mediante la detección de los niveles de expresión de LC3BII en ensayos de western blott. Se observó que la estimulación con PP242 incrementó los niveles de expresión de LC3BII, sugiriendo activación de la vía autofágica. Además se evaluaron otras moléculas que participan en la vía de autofagia y apoptosis, como Bcl-XL, Bcl-2 y Beclin-1 y por citometría de flujo, se investigó si la estimulación de autofagia es capaz de modular el efecto en la muerte celular de LB tratados con Fludarabina. El desarrollo de este proyecto podría aportar información útil para definir el rol de mTOR en la regulación de la autofagia en LB neoplásicos.