MORÓN VÍCTOR GABRIEL
Congresos y reuniones científicas
Título:
LOS BACULOVIRUS (BV) UTILIZAN TLR9 PARA ACTUAR COMO VECTORES DE INMUNIZACIÓN Y GENERAR UNA RESPUESTA CITOTÓXICA CONTRA LOS ANTÍGENOS (Ag) EXPRESADOS EN SU CÁPSIDE
Autor/es:
MARÍA INÉS CRESPO; PAULA MOLINARI; GUIDO N. MOLINA; OSCAR TABOGA; GABRIEL MORÓN
Lugar:
Cordoba
Reunión:
Congreso; II Congreso Científico Profesional de Bioquímica 2019.; 2019
Institución organizadora:
Facultad de Ciencias Químicas de la UNC y de la UCC
Resumen:
genomas de ADN doble cadena, patógenos exclusivamente
para insectos. No existe ningún reporte de su patogenicidad en
vertebrados. Previamente mostramos que BV expresando Ag
exógenos en su cápside (BVOVA) inducen una fuerte respuesta
citotóxica Ag específica in vivo. Los BV ingresan íntegros a
compartimentos subcelulares de células dendríticas (DC) y tras
un proceso de acidificación mediado por vesículas lisosomales,
la cápside viral alcanza el citoplasma.
OBJETIVO: Estudiar el mecanismo por el cual los BV estimulan
DC para activar linfocitos T citotóxicos (CTL).
MATERIALES Y MÉTODOS: DC esplénicas de ratones C57BL/6
estimuladas con BVOVA fueron incubadas con el hibridoma de
células T CD8 B3Z específico para OVA257-264, para evaluar la
presentación de Ag mediada por MHC I. Para estudiar la
respuesta CTL in vivo, se inmunizaron ratones vía i.v. con
BVOVA. Análisis estadístico: t student.
RESULTADOS: La neutralización de la proteína de fusión GP64
de la envoltura del BV con un anticuerpo monoclonal inhibió su
capacidad de estimular en DC la activación de LT CD8 in vitro
(p<0,01). Dicha activación también fue inhibida cuando las DC
fueron tratadas con cloroquina (inhibidor de acidificación
endosomal) (p<0,05) o lactacistina (inhibidor de proteosoma)
(p<0,01). Estos resultados concuerdan con los obtenidos
previamente por microscopía. La respuesta de CTL en ratones
deficientes en TLR9 inmunizados con BVOVA fue menor que la
de ratones wt (p<0,001). Ratones deficientes en el receptor de
IFN tipo I pueden desarrollar una respuesta CTL normal
(p>0,05).
CONCLUSIÓN: Los BV requieren la maduración de los
endosomas y la presencia de TLR9 en las DC para generar CTL.
La proteína de fusión GP64 mediaría el escape de los BV al
citoplasma dentro de las DC. Allí los BV son procesados por el
proteosoma para entrar en la vía de presentación MHC I. La
generación de CTL mediada por BV no requiere la participación
de los IFN tipo I.
para insectos. No existe ningún reporte de su patogenicidad en
vertebrados. Previamente mostramos que BV expresando Ag
exógenos en su cápside (BVOVA) inducen una fuerte respuesta
citotóxica Ag específica in vivo. Los BV ingresan íntegros a
compartimentos subcelulares de células dendríticas (DC) y tras
un proceso de acidificación mediado por vesículas lisosomales,
la cápside viral alcanza el citoplasma.
OBJETIVO: Estudiar el mecanismo por el cual los BV estimulan
DC para activar linfocitos T citotóxicos (CTL).
MATERIALES Y MÉTODOS: DC esplénicas de ratones C57BL/6
estimuladas con BVOVA fueron incubadas con el hibridoma de
células T CD8 B3Z específico para OVA257-264, para evaluar la
presentación de Ag mediada por MHC I. Para estudiar la
respuesta CTL in vivo, se inmunizaron ratones vía i.v. con
BVOVA. Análisis estadístico: t student.
RESULTADOS: La neutralización de la proteína de fusión GP64
de la envoltura del BV con un anticuerpo monoclonal inhibió su
capacidad de estimular en DC la activación de LT CD8 in vitro
(p<0,01). Dicha activación también fue inhibida cuando las DC
fueron tratadas con cloroquina (inhibidor de acidificación
endosomal) (p<0,05) o lactacistina (inhibidor de proteosoma)
(p<0,01). Estos resultados concuerdan con los obtenidos
previamente por microscopía. La respuesta de CTL en ratones
deficientes en TLR9 inmunizados con BVOVA fue menor que la
de ratones wt (p<0,001). Ratones deficientes en el receptor de
IFN tipo I pueden desarrollar una respuesta CTL normal
(p>0,05).
CONCLUSIÓN: Los BV requieren la maduración de los
endosomas y la presencia de TLR9 en las DC para generar CTL.
La proteína de fusión GP64 mediaría el escape de los BV al
citoplasma dentro de las DC. Allí los BV son procesados por el
proteosoma para entrar en la vía de presentación MHC I. La
generación de CTL mediada por BV no requiere la participación
de los IFN tipo I.
