LÓPEZ TEIJELO MANUEL
Congresos y reuniones científicas
Título:
ESTUDIOS ELIPSOMÉTRICOS DE PELÍCULAS DE ADN ADSORBIDAS SOBRE CARBONO VÍTREO
Autor/es:
M.L. PEDANO; M. LOPEZ TEIJELO; G.A. RIVAS
Lugar:
Termas de Río Hondo, Santiago del Estero
Reunión:
Congreso; XIV Congreso Argentino de Fisicoquímica y Química Inorgánica; 2005
Institución organizadora:
AAIFQ
Resumen:

En los últimos años, los biosensores electroquímicos han tenido un gran desarrollo debido a la sensibilidad de las técnicas electroquímicas, su practicidad y relativo bajo costo. Dentro de estos biosensores, los de afinidad conteniendo ácidos nucleicos (ANs) como elemento de reconocimiento han cobrado gran importancia debido a la posibilidad de detectar el evento de hibridación, como así también la interacción de ANs con fármacos ó contaminantes. Sin embargo, para lograr un diseño racional y buena performance de dichos biosensores, es indispensable un estudio previo sobre las condiciones óptimas de inmovilización de los ANs sobre la superfície del electrodo, al igual que el conocimiento y caracterización de la capa de ANs inmobilizada. En el presente trabajo se estudia por elipsometría la adsorción electroquímica in-situ de ADN sobre electrodos de carbono vítreo (CV). El objetivo es caracterizar la capa de ADN inmovilizada y dilucidar el efecto de distintos pretratamientos superficiales en la adsorción de ANs sobre CV, para el posterior desarrollo de biosensores conteniendo ADN como elemento de bioreconocimiento. Los estudios elipsométricos in-situ se realizaron empleando soluciones de ADN de 1, 2 y 3 ppm en “buffer” acetato 0,20M pH: 5,00 (electrolito soporte). Como ´blanco´ se empleó la respuesta elispométrica del electrodo de CV pulido, en el electrolito soporte, al potencial de trabajo. La película de ADN fue adsorbida a partir de la solución correspondiente a distintos potenciales (circuito abierto; -0,200; 0,000; +0,200; +0,500 V) durante 3 hs. Se efectuaron  diversos pretratamientos electroquímicos en “buffer” acetato 0,20 M pH: 5,00 ; “buffer” fosfato 0,05 M pH: 7,40 e NaOH 0,10 M. Los valores de Psi y Delta obtenidos para la deposición de ADN a partir de soluciones de 1ppm a distintos potenciales de adsorción, muestran un incremento de la señal con el tiempo, hasta aproximadamente 1 hora. De los gráficos de Psi vs Delta para los distintos potenciales de adsorción, pretratamientos y concentraciones estudiadas, se puede observar que la adsorción de ANs  sobre CV sin pretratar, sigue la misma tendencia general para todos los potenciales de adsorción estudiados. (Aumento de Psi y Delta con el tiempo de adsorción. Gráficos lineales de Psi vs Delta con pendientes similares, ajustables con modelos de película simple, anisotrópica, no dicroica, con  valores de índice de refracción ordinario (no) menores al extraordinario (ne) y similares al del agua (na)). Los pretratamientos tienen un marcado efecto sobre la adsorción de ADN, minimizando la misma. No se observa un cambio apreciable de las propiedades físicas y ópticas de la película adsorbida con el aumento de la concentración ensayada, lo que indicaría que bajo esas condiciones la película es laxa y todavía no llegaría a formar multicapas. Los valores de índice de refracción no y ne son muy similares al del agua (na), lo que indica que se trataría de una película muy hidratada.