Evaluación de la estabilidad y la actividad antimicrobiana de sistemas farmacéuticos que contienen rifampicina

DAN CÓRDOBA ANTONELLA DEL V.; AIASSA, VIRGINIA; LONGHI, MARCELA R.; ZOPPI, ARIANA

Simposio; Simposio Iberoamericano COIFFA 2022; 2022

INTRODUCCIÓN: En los últimos años, los biofilms bacterianos han suscitado un gran interés por su presencia en la mayoría de las infecciones asociadas a la asistencia sanitaria. Rifampicina (RIF), es un potente antibiótico capaz de atacar los biofilms formados por Staphylococcus aureus meticilino resistentes (SAMR), que presenta problemas de solubilidad y estabilidad, lo cual puede limitar su biodisponibilidad y eficacia terapéutica. En trabajos previos demostramos que la formación de complejos con γ-ciclodextrina (γ-CD) y L-arginina (ARG) aumenta la solubilidad del fármaco1. Continuando con nuestra investigación el objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto producido por la formación de complejos sobre la estabilidad y la actividad antibiofilm de RIF. METODOLOGÍA: La presente investigación muestra el desarrollo y validación de un método de cromatografía liquida de alta eficacia (HPLC) para la cuantificación de RIF y la implementación de estudios de degradación acelerados. La concentración mínima inhibitoria (CIM) contra SAMR se determinó usando el método estándar de dilución en tubo. La actividad metabólica del biofilm se estudió mediante el ensayo de reducción de XTT. Los biofilms formados se analizaron por microscopia electrónica de barrido (SEM). RESULTADOS: El método HPLC desarrollado para la cuantificación de RIF cumplió con los parámetros de selectividad, linealidad, precisión y exactitud, indicando que se trata de un método simple y confiable. Los estudios de estabilidad acelerados permitieron determinar una cinética de degradación de pseudo-primer orden para RIF, con una constante de velocidad (K) de 30 ± 1 h-1, un tiempo de vida media (t1/2) de 23 ± 1 h, y un tiempo de vida útil (t90) de 3,5 ± 0,1 h. Además, se observó que el agregado de γ-CD y ARG no producen cambios en la estabilidad del fármaco. La CIM contra SAMR obtenida para RIF fue 1,00 µg/ml. La evaluación de la actividad metabólica mediante el ensayo de XTT, permitió demostrar que SAMR tiene alta capacidad de producir biofilm (OD490 nm de 3,1 ± 0,2). Además, se comprobó que γ-CD y ARG puros no afectan el metabolismo del biofilm. El análisis mediante SEM demostró que RIF pura y RIF:γ-CD no provocaron una disminución significativa de la adhesión celular, aunque fue posible observar daño celular. Por otra parte, el sistema RIF:γ-CD:ARG mostró una buena actividad antibiofilm con un importante daño a la célula bacteriana. CONCLUSIONES. Los estudios de estabilidad permitieron determinar que la formación del complejo multicomponente no afecta la estabilidad del fármaco mientras que permite mejorar la eficacia antibiofilm, resultando un sistema prometedor con un interesante potencial antimicrobiano.