LOCALIZACIÓN SUBNUCLEAR DIFERENCIAL DE LAADN-GLICOSILASA MBD4L MEDIADA POR UN EXITRON

Cecchini NM, Cobo S, Nota F,Torres J, Álvarez ME

Centro de Investigaciones enQuímica Biológica de Córdoba, CIQUIBIC, CONICET, Departamento de QuímicaBiológica Ranwel Caputto, Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Nacionalde Córdoba, Argentina.

E-mail: ncecchini@unc.edu.ar;malena@fcq.unc.edu.ar

Las ADN glicosilasas son enzimasesenciales en la reparación de bases dañadas del ADN y mantenimiento de laestabilidad genómica de los organismos. La glicosilasa nuclear MBD4L de laplanta Arabidopsis es clave en distintas condiciones de estrésgenotóxico. Curiosamente, el gen MBD4L puede generar dos isoformasdebido a la retención de un intrón críptico codificante o exitrón.Análisis in silico sugieren que el splicing de los exitrones afectanpreferencialmente dominios funcionales y/o sitios de modificacionespostraduccionales de las proteínas. Teniendo esto en cuenta, examinamos lalocalización y los niveles transcripcionales de las isoformas de MBD4L bajodistintas condiciones de estrés. Encontramos que cuando se expresan comofusiones a GFP, estas se localizan en diferentes compartimentos subnucleares tantoen plantas de Arabidopsis como de Nicotiana benthamiana. Además,los transcriptos alternativos de MBD4L cambian sus niveles relativosfrente a altas temperaturas, lo que se corresponde con cambios en lalocalización de la proteína. En concordancia, plantas que expresan una versiónsintética del gen MBD4L, incapaz de generar transcriptos alternativos,no muestra diferencias en la posición nuclear de la proteína bajo estréstérmico. Estos hallazgos revelan a un exitrón determinando la localizaciónsubcelular. Se presentará un modelo putativo para la función/localizaciónnuclear de MBD4L.