EFECTOS DEL PÉPTIDO DE ORIGEN VEGETAL JABURETOX SOBRE COMPONENTES DEL SISTEMA INMUNE DE RHODNIUS PROLIXUS (HEMIPTERA: REDUVIIDAE)

Cordoba

Congreso; XXII Jornadas Científicas de la sociedad de biología de Córdoba; 2019

Sociedad de Biología de Córdoba

Los insectos carecen de inmunidad adaptativa y despliegan para su defensa una eficiente respuesta inmune innata. La mismaes llevada a cabo por componentes celulares, hemocitos, responsables de la fagocitosis, la encapsulación y la nodulación depatógenos, y por mediadores humorales. La lipoforina, principal lipoproteína en la circulación de los insectos, es sintetizadapor el cuerpo graso y distintos estudios han demostrado que tiene capacidad para unir e inactivar diversas toxinas, así comoatrapar y neutralizar agentes exógenos. Jaburetox (Jbtx) es un péptido entomotóxico recombinante obtenido a partir de una delas principales isoformas de la ureasa de la leguminosa Canavalia ensiformis. El triatomino Rhodnius prolixus es uno de losvectores de mayor importancia epidemiológica para la enfermedad de Chagas. Además de ser un modelo de laboratorio paraestudios básicos de fisiología de insectos, ha sido empleado para dilucidar los mecanismos de acción de ureasas vegetales ypéptidos derivados. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto entomotóxico de Jbtx sobre las poblaciones de hemocitosy sobre la expresión de lipoforina en cuerpo graso de ninfas V del vector R. prolixus. Para los estudios, los insectos fueroninyectados en el hemocele con PBS (grupo control) o con Jbtx (0,025 µg/mg de peso del insecto, grupo problema). A distintostiempos post-inyección (3, 6 y 20 h) se procedió a la colección de la hemolinfa y a la disección del cuerpo graso segúncorresponda. Para los ensayos de citometría de flujo, las muestras de hemolinfa fueron tratadas con ioduro de propidio (PI)como fluorocromo marcador de la permeabilidad de la membrana plasmática. En estos ensayos se evaluaron modificacionessobre el tamaño (FSC), la complejidad (SSC) y la captación de PI en los hemocitos analizando los resultados en escalalogarítmica. Por otro lado, los cuerpos grasos fueron homogenizados y procesados para ensayos de ELISA y qPCR a los finesde evaluar los niveles de lipoforina y la expresión del transcripto. También se incluyeron ensayos preliminares deultracentrifugación analítica empleando lipoforina y Jbtx con el objetivo de estudiar una posible interacción entre ambasmoléculas. Los resultados de citometría de flujo mostraron que los hemocitos del grupo de insectos tratados con Jbtx son máspermeables al PI, sugiriendo un potencial efecto deletéreo de la toxina sobre estas células. En las condiciones analizadas, eltratamiento con Jbtx no indujo modificaciones significativas en la expresión de lipoforina en cuerpo graso. En conjunto, estoshallazgos constituyen un punto de partida para futuros estudios dirigidos a obtener un mejor entendimiento del mecanismo deacción de esta toxina, necesarios para su aplicación como bioinsecticida en el control de especies plaga