OLIVEIRA RAFAEL GUSTAVO
Congresos y reuniones científicas
Título:
Utilización de herramientas fisico-quimicas para el estudio de capas de mielina
Autor/es:
PUSTERLA JULIO MARTÍN; RAFAEL GUSTAVO OLIVEIRA
Lugar:
Córdoba
Reunión:
Jornada; III Jornada de Jovenes Investigadores en Neurociencias de Córdoba; 2011
Resumen:

La mielina es el material membranoso que cubre los axones y provee de rápida conducción eléctrica. El presente proyecto plantea continuar con la caracterización de capas (mono- o multi-moleculares) derivadas de mielina purificada de fuentes naturales que se viene realizando en nuestro laboratorio desde hace quince años. El proyecto a largo plazo es la determinación de un diagrama de fases para sistemas derivados de mielina, en función de variables externas, tanto manteniendo la composición lipo-proteica natural de la membrana como alterándola químicamente. La variación de la temperatura tiene especial relevancia a la hora de evaluar si los trabajos en que se aíslan supuestos dominios de membranas que existirían fisiológicamente son confiables o serian artefactuales. Técnicas actualmente en uso para aislar dominios de membrana involucran el tratamiento en frío con detergentes. La pregunta crucial es si este tratamiento (u otros) puede(n) modificar el estado físico de la mielina. Cuan estable es la estructura de la membrana frente a variaciones internas y/o externas? Se compararan resultados obtenidos para sistemas de monocapas en interfase aire/agua, membranas en suspensión acuosa y sobre diferentes soportes. Para las membranas de mielina (o sus lípidos purificados) se planea obtener difractogramas de polvo de rayos-x a bajo ángulo (small angle x-ray scattering) en diferentes condiciones ambientales. Dichas condiciones se refieren a la composición de solutos no iónicos o iónicos, tanto monovalentes como bivalentes. Asimismo, para cada condición se realizará un barrido térmico que comprenda desde el rango fisiológico hasta al empleado en la obtención de dominios de membranas por extracción con detergentes. Los difractogramas de SAXS permiten determinar (a través de la separación de los picos de difracción correspondiente al espaciamiento entre bicapas) si existe o no coexistencia de fases en respuesta a la composición del entorno. Observaciones análogas se realizarán en monocapas en interfase aire/agua utilizando microscopias de fluorescencia y de ángulo de Brewster como así también de SAXS a ángulo rasante. Un objetivo colateral es determinar hasta que punto monocapas y multicapas se comportan equivalentemente en un sistema con proteínas intrínsecas de membranas.